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灰绿曲霉β-葡萄糖苷酶分离纯化及性质的中期报告 一、研究背景 灰绿曲霉(Aspergillusniger)是一种广泛存在于自然界中的真菌,具有许多工业应用价值。其中,灰绿曲霉β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase)是一种重要的水解酶,在发酵生产中有广泛应用。因此,研究β-glucosidase的分离纯化及其性质,对于提高生产效率、降低成本具有重要意义。 二、研究方法 1.菌种培养及酶提取:灰绿曲霉菌株经预处理后,接种于含有木质素的液体培养基中进行发酵培养。发酵液经过离心、过滤等步骤进行粗提取。 2.离子交换层析分离纯化:将酶提取物转入预先平衡的离子交换树脂(DEAE-Sepharose)柱中,根据酶的电荷特性进行分离纯化。 3.凝胶层析分离纯化:将DEAE-Sepharose柱的洗脱液转入大小分别为SephadexG-100和SephadexG-75的凝胶柱中,根据酶的分子量特性进行分离纯化。 4.酶活力测定及性质分析:通过对纯化后的酶样品进行酶活力测定,进一步对其进行性质分析。 三、研究进展 目前,实验已经完成了灰绿曲霉β-葡萄糖苷酶的酶提取、离子交换层析分离纯化和凝胶层析分离纯化,并获得了较纯的酶样品。下一步将对酶活力进行测定,并进一步对其进行性质分析。同时,为了提高分离纯化效率,将对操作条件进行优化,进一步提高酶纯化效果。 四、下一步工作 1.对纯化后的酶样品进行酶活力测定,进一步对其进行性质分析。 2.进行操作条件的优化,进一步提高酶纯化效果。 3.研究酶的应用价值,探究其在发酵生产中的应用。