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共生转录因子表达载体的构建及转基因水稻培育的中期报告 一、共生转录因子表达载体的构建 1.1基因序列获取 首先,我们获取了共生转录因子基因序列并进行了序列分析。通过对比分析,我们选择了一个最具代表性的基因并进行了进一步的研究。 1.2构建表达载体 我们从pCAMBIA1301载体中扩增了CaMV35S促进子和NOS终止子,并将其克隆至pCAMBIA3301载体中。然后,我们按照基因的序列信息,通过PCR扩增的方法,将共生转录因子的编码区域克隆至pCAMBIA3301载体中,与之前克隆的促进子和终止子相连接。最终,我们成功构建了表达载体。 二、转基因水稻培育过程 2.1农杆菌介导的遗传转化 我们采用农杆菌介导的遗传转化技术将上述共生转录因子表达载体导入水稻中。首先,我们筛选得到了适合遗传转化的随机群体,并用这些群体进行了试验。我们首先通过分别对稻花进行注射的方式将农杆菌感染到稻花内。然后,我们将稻花转移到包含抗生素的培养基中,以筛选受到转化的组织。经过多次筛选,我们最终得到了两个转基因水稻品系。 2.2筛选和鉴定转基因植株 为了进一步筛选和鉴定转基因水稻品系,我们进行了PCR及Southern杂交等方法验证。经过这些步骤,我们证实了转基因品系的存在,并确定了其遗传特征。同时,我们也对转基因品系的农艺性状进行了评估,发现这些品系与野生型水稻相比没有明显的生长和形态差别。 三、中期报告 我们已经成功地构建了共生转录因子表达载体,并通过农杆菌介导的遗传转化技术,得到了两个转基因水稻品系。经过PCR及Southern杂交等方法的筛选和鉴定后,我们证实了转基因品系的存在,并确定了其遗传特征。未来,我们将进一步研究这些转基因品系的生物学特征以及对农业生产的应用。