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用莱茵衣藻表达外源蛋白的研究的综述报告
莱茵衣藻（Chlamydomonasreinhardtii）是一种单细胞绿藻，常被用作生物技术中的模式生物。由于其细胞壁松散、细胞大小适中、遗传技术成熟、基因组已被测序等特点，莱茵衣藻被广泛应用于生物高效表达外源蛋白的研究中。本文将就莱茵衣藻在外源蛋白表达研究中的应用，进行一些综述。
1.转化方法
莱茵衣藻的转化方法主要有：基因枪法、互助转化法和融合法三种。基因枪法是将DNA颗粒加载到生物枪中，在高压气体作用下将DNA直接注射至莱茵衣藻细胞内。互助转化法利用细菌质粒为载体，将外源DNA通过细菌转化到莱茵衣藻细胞中。融合法是将莱茵衣藻细胞和另一种带有外源DNA的物种细胞通过高压融合方法融合成混合细胞，通过筛选后可得到表达外源蛋白的突变株。
2.选择表达载体
莱茵衣藻外源蛋白表达主要利用的载体有：原核表达载体、真核表达载体和近纯化后的基因重组载体。对于简单的蛋白质（例如抗生素），可用原核表达载体表达；对于复杂的蛋白质（例如人血管内皮生长因子），常选用真核表达载体或近纯化后的基因重组载体表达。
3.基因的启动子和终止子选择
莱茵衣藻基因的启动子主要有龙头结构（promoter）和编码基因的5'端非翻译区域（5'UTR）。常用的启动子包括丝素结节病毒40号（SV40）启动子、鸟嘌呤核苷酸转移酶（Gpt）基因启动子等。终止子一般采用真核细胞常用的终止子（例如SV40终止子）。
4.融合蛋白表达
融合蛋白是由两个或更多的结构域组成的一种蛋白质，通常由两部分组成：外部的易变性、可表达性和功能域和核心稳定结构。常见的融合蛋白有马铃薯病毒X蛋白（PVX），绿色荧光蛋白（GFP）和酵母两性转录因子Gal4。由于融合蛋白通常具有易表达、易纯化和易检测的特点，因此在外源蛋白表达中得到了广泛应用。
总之，莱茵衣藻在外源蛋白表达研究中的应用非常广泛。莱茵衣藻表达外源蛋白不仅方便、快捷、经济，而且可应用于生产范畴，可以大大增强我国生物技术产业竞争力。