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胚胎干细胞诱导分化为大脑皮质谷氨酸能神经元的实验研究的中期报告
背景：
大脑皮层是哺乳动物的一个重要的神经系统，含有数十亿个神经元，控制着身体的各种活动，包括感官、情感和认知功能等。近年来，胚胎干细胞被认为是研究大脑皮层各类神经元分化和调控的一种有力工具。因此，本研究旨在将胚胎干细胞诱导分化为大脑皮质的谷氨酸能神经元，为深入研究大脑皮质神经元变异性以及更好的认识神经系统疾病发病机制奠定基础。
方法：
1.胚胎干细胞培养和维护
使用小鼠胚胎干细胞（mESCs）进行实验研究，采用无血清培养基（NSC）对其进行培养和维护。
2.胚胎干细胞向前脑皮质-NPC的分化
通过使用SIGMA的N2B27培养基、再生素、FGF2、SHH和Purmorphamine等化学物质的组合，将胚胎干细胞诱导分化为前脑组织器官样结构和神经前体细胞（NPC）。
3.胚胎干细胞从前脑皮质-NPC到谷氨酸能神经元的分化
使用神经营养因子、B27补充剂、IGF-1、Glutamax和谷氨酰酶等分子，将胚胎干细胞的前脑神经前体细胞分化为谷氨酸能神经元。
结果：
1.使用化学物质的组合将胚胎干细胞诱导分化为前脑组织器官样结构和神经前体细胞（NPC），证明了化学物质可以促进mESCs的向前脑皮层-NPC的分化，并且NPC的扩增和分化是可控的。
2.使用神经营养因子、B27补充剂、IGF-1、Glutamax和谷氨酰酶等分子，将胚胎干细胞的前脑神经前体细胞分化为谷氨酸能神经元。
3.通过免疫细胞化学染色，证明了诱导分化出的细胞表达目标基因GABA和VGLUT1，这些基因与成熟的大脑皮质神经元有关。
结论：
本实验成功地将小鼠胚胎干细胞诱导分化为大脑皮质的谷氨酸能神经元，为进一步研究大脑皮质神经元的功能和变异性提供了基础。