牛胚胎移植简介.ppt

牛胚胎移植简介一、胚胎移植的技术程序胚胎移植的技术程序包括供体和受体的准备，供体超数排卵处理和配种，胚胎的收集，胚胎的检查，胚胎移植等为了从供体母畜得到较多供移植的胚胎，需对供体母畜进行超数排卵处理。同时，胚胎移植成功与否和供体、受体发情同期化成度密切相关，故需人为地控制供体和受体地发情时间，进行同期化处理。所以，超数排卵和同期发情是进行胚胎移植必须首先完成地两个基本步骤。（一）供体和受体母畜的准备

每头供体需准备数头受体，受体母畜可选用非良品种的个体，但应具有良好的繁殖性能和健康状态，体况中上等。在拥有大量母畜的情况下，可选择与供体发情时间相同的自然发情个体作受体，供体与受体母畜发情时间前后相差不宜超过一天。由于在一般情况下难以找到足够数量的自然发情母畜作受体，所以多采用对受体母畜进行同期发情处理，其方法见发情控制技术。(二)超数排卵处理

1．超排处理的意义很显然，如果不能得到足够数量的胚胎，就无法充分发挥胚胎移植的优势。所以对供体母畜进行超排处理已成为胚胎移植技术程序中不可缺少的一个环节。从理论上讲经超排处理后排出的卵子越多越好，而事实上如果一次排出的卵子太多，往往会因为促性腺激素使用剂量过大而影响胚胎的质量，出现受精率降低，同时胚胎的收集率也降低。对于牛和羊一般认为一次排出10－15枚卵子的超排效果较为理想。

2．超排处理方法在母畜发情周期的适当时期，利用外源性促性腺激素处理，增进卵巢的生理活性，诱发许多卵泡同时发育成熟并排卵。（1）母牛在发情周期的第16或17天肌肉或皮下注射PMSG1500－2000IU。该方法是按照发情周期的规律，在黄体期即将结束，卵泡期即将来临前，顺势促进较多的卵泡生长和成熟。这种超排方法必须和发情周期的进程配合好，所以在时间安排上受到限制，应用很不方便。另一种方法是在发情周期的中期，在注射促性腺激素的同时，注射或子宫灌注PGF2a或其类似物以溶解黄体。一般是在发情周期第10～13天内进行。具体做法是在注射PMSG后，隔日肌肉注射PGF2a或5～10mg，或子宫灌注PGF2a2～3mg。如用FSH，则连续注射4～5天，每天两次，总剂量为30～40mg（国产品400～500大鼠单位），在第5次注射FSH的同时注射PGF2a。

（2）母羊在发情周期的第16～18天，一次肌注（或皮下）PMSG750～1500IU，或每天注射两次FSH，连3～4天，出现发情后或配种当日再肌注hCG500～700IU。也可象母牛一样，在发情周期中期处理，即在注射PMSG之后，隔日注射PGF2a或其类似物。如采用FSH，用量为10～20mg（或200～300大鼠单位），分3天6次注射，第5次同时注射PGF2a。

用PMSG超排处理牛、羊，虽然使用方便，仅需注射一次，但由于其半衰期长，会产生后效应，导至发情期延长。因此，用PMSG进行超排受到局限，结合注射PMSG抗血清可以消除半衰期过长的副作用。目前多采用FSH进行超排，连续注射3～5天，每天2次，剂量均等或递减，效果较好。

超排效果受动物的遗传特性、体况、年龄，发情周期的阶段、产后时间的长短、卵巢功能、季节、激素的品质和用量等多种因素影响。所以，不同的品种，不同的个体，对超排处理的反应差异极大，超排效果很不稳定。这方面迄今仍是胚胎移植中有待改进的问题之一。（三）供体母畜的配种（四）胚胎的收集收集胚胎时应考虑配种时间、排卵的大致时间、胚胎运行的速度和发育阶段等因素。只有这样才能顺利地完成胚胎的收集过程，并得到较高的胚胎回收率。各种家畜授精后胚胎发育的速度和运行情况见表。

胚胎收集的时间不应该早于排卵后的第一天，最早应在受精卵完成第一次卵裂之后，否则不易辨别卵子是否受精。收集时间一般在配种后的3～8天，牛最好是在配种后的6～8天，即胚胎发育至桑椹胚或者早期囊胚，以便非手术法收集和移植。

1．手术法收集胚胎根据畜种的不同及外科手术的要求，在腹中线或腹侧作一切口，先将一侧输卵管及子宫角移出腹腔，用注射器吸取冲卵液注入输卵管或子宫角内进行冲洗，并观察卵巢上的排卵情况。然后将该侧送回腹腔，并移出另一侧，用同样方法进行冲洗。手术法冲洗胚胎有以下几种方式（图10－2）。一种方式是用注射器的磨钝针头刺入子宫角顶端，注入冲洗液，然后再输卵管的伞部接取冲卵液，这种方式适用于牛、羊、兔等。另一种方式冲洗的方向与此相反，即由伞部注入冲洗液，在子宫角上端接取。猪和马的子宫角与输卵管的接合部有一活塞结构，用第一种方式，冲洗液不易通过，因此多采用第二种方式。上述两种方式是当胚胎还处于输卵管时采用。当确认所有的胚胎都已进入子宫角内时，可采用冲洗子宫角的方式，即从子宫角上端注入冲卵液，由基部接取，或者相反。这种方式适合于各种家畜。冲卵液用量以子宫角容积大小而异。冲卵操作，要求迅速准