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玉米行粒相关蛋白(ZmSTKR)互作蛋白的筛选与验证的中期报告 摘要: 玉米行粒相关蛋白(ZmSTKR)是一种重要的信号转导蛋白,它与许多蛋白质相互作用,参与了植物生长发育和应对环境胁迫的调节过程。本研究旨在筛选和验证ZmSTKR的互作蛋白质,以进一步研究其在植物生长中的功能和机制。 方法: 首先,利用酵母双杂交实验筛选与ZmSTKR相互作用的潜在蛋白质,并利用PCR、双重限制酶切和DNA测序对其进行鉴定和确认。同时,利用重组蛋白的GSTpull-down实验来验证这些潜在蛋白与ZmSTKR间的交互作用。最后,利用免疫共沉淀技术进一步证实ZmSTKR互作蛋白质与其的物理相互作用。 结果: 目前,我们已经筛选出了20多个与ZmSTKR有可能发生相互作用的蛋白质,经过PCR鉴定、限制酶切和DNA测序,我们成功鉴定了其中15个蛋白质的序列。通过GSTpull-down实验,我们成功鉴定了其中5个蛋白质与ZmSTKR之间的交互作用,并进行了浓度响应实验,初步验证了它们的互作关系。最后,利用免疫共沉淀技术,我们进一步证实了其中3个蛋白质与ZmSTKR的物理相互作用。 结论: 本研究筛选并初步验证了多个与ZmSTKR可能发生相互作用的蛋白质,通过GSTpull-down实验和免疫共沉淀技术,初步验证了它们的互作关系和物理相互作用。这些结果揭示了ZmSTKR在植物生长发育和应对环境胁迫的调节过程中的潜在作用机制,对深入探究其功能具有重要意义。