SMC56复合物调控p53介导的凋亡研究的中期报告.docx

SMC56复合物调控p53介导的凋亡研究的中期报告
本研究的主要目标是探究SMC56（一个六个蛋白亚基组成的复合物）在调节p53介导的细胞凋亡中的作用。研究经过了初步实验的优化和完善，目前已完成实验设计、基础实验和初步结果的分析。以下是中期报告的总结。
实验设计：
1.细胞系选取
我们选用了在人体肺癌中广泛表达的A549细胞作为研究对象。
2.实验组设计
我们将A549细胞分为以下五组：
-对照组（Controlgroup）：细胞不经过任何处理。
-siRNA对照组（siRNAControlgroup）：细胞先经过siRNA和转染剂的共同处理，再不同时间点进行检测。
-siRNA-SMC56组（siRNA-SMC56group）：细胞先经过SMC56siRNA和转染剂的共同处理，再不同时间点进行检测。
-siRNA-p53组（siRNA-p53group）：细胞先经过p53siRNA和转染剂的共同处理，再不同时间点进行检测。
-siRNA-SMC56+siRNA-p53组（siRNA-SMC56+siRNA-p53group）：细胞先经过SMC56siRNA、p53siRNA和转染剂的共同处理，再不同时间点进行检测。
3.实验流程
我们设计了以下实验流程：
-细胞培养：将A549细胞在37°C、5%CO2条件下培养至80%的密度。
-siRNA转染：使用Lipofectamine2000将SMC56siRNA和p53siRNA转染至细胞内。
-细胞取样：分别在转染后0小时、24小时、48小时和72小时取样。
-蛋白质提取：利用RIPA混合液和PMSF溶液在冰箱中将细胞蛋白提取出来。
-Westernblot：将蛋白提取液用SDS-PAGE电泳，然后转移到PVDF膜上。用不同的抗体进行检测，包括SMC56、p53、Bax和Bcl-2等。
初步结果分析：
初步的Westernblot结果表明，SMC56siRNA能够成功降低A549细胞中SMC56的表达水平，而p53siRNA能够成功降低A549细胞中p53的表达水平。此外，我们还发现降低SMC56的表达会导致p53和Bax的表达水平的升高，Bcl-2的表达水平的降低。降低p53的表达会导致Bax的表达水平的降低，Bcl-2的表达水平的升高。
未来工作：
下一步的工作将重点在以下几个方面：
1.继续优化实验条件，提高实验重复性和可靠性。
2.增加样品数量，加强实验的统计学意义。
3.使用其他实验方法，如流式细胞术，进一步验证实验结果。
4.探究SMC56和其他凋亡相关基因的关系，找到更深入的机制。