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猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白原核表达及单克隆抗体的研制的综述报告 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV)是一种美国和欧洲地区广泛分布的重要猪病毒,属于积病毒科(Arteriviridae)下的只有一个种的病毒。该病毒感染猪的哺乳幼崽、生长育肥猪及成年猪均可引起极其严重的疾病,给猪产业造成了严重的经济损失。为了控制该病毒的传播和发病,开发有效的预防和治疗手段显得十分必要。 N蛋白是PRRSV病毒大分子结构蛋白的一部分,是PRRSV病毒的一个重要标志物。作为一个高度保守的分子,它被广泛用于PRRSV的检测和诊断。N蛋白的孔蚀表达和单克隆抗体研究是目前PRRSV检测和诊断的主要手段之一。 N蛋白的原核表达可以通过大肠杆菌(E.coli)作为宿主体进行,该系统具有高效、快速和经济的特点,可以大量快速地分泌重组蛋白。研究人员选择合适的原核表达载体,并将PRRSVN蛋白基因插入其中。此外,亦需要在大肠杆菌中酶水解来使其折叠成正确的三维空间构型。使用SDS-PAGE电泳法,核磁共振谱等技术,研究人员肯定了表达的N蛋白与PRRSV的天然蛋白具有相同的特性。 PRRSVN蛋白的单克隆抗体的研制也成为当前的研究热点。单克隆抗体具有较高的特异性和亲和力,广泛应用于PRRSV的检测和诊断。目前,产生单克隆抗体的方法主要有小鼠杂交瘤法、兔杂交瘤法、用人源抗体基因重组鼠、骆驼单克隆抗体和鸟嘌呤酸类似物嵌合抗体等。相比较而言,骆驼单克隆抗体具有天然的高亲和性、高特异性和易于大规模生产等优点,因此该方法逐渐成为研究PRRSV单克隆抗体的新技术。 总之,PRRSV病毒的研究对于提高猪产业的生产效益具有重要意义。通过对其N蛋白的核酸表达和单克隆抗体的研制,可以快速、准确地检测和诊断PRRSV病毒及其变异株,为控制PRRSV病毒传播提供有力的技术支持。