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利迪链霉菌A02高产纳他霉素工程菌的选育的中期报告 背景 纳他霉素是一种广谱抗生素,可以抑制细菌转录和翻译过程中的蛋白合成,被广泛应用于临床治疗。利迪链霉菌生产纳他霉素的能力较强,但是其产量仍有提高的空间。 目的 本研究旨在通过利用基因工程技术选育出利迪链霉菌A02高产纳他霉素的工程菌,并对其产量进行评估。 方法 1.构建纳他霉素生物合成途径酮脱氢酶的过量表达载体; 2.将过量表达酮脱氢酶的载体转化至利迪链霉菌A02中; 3.通过筛选、优化培养条件等步骤,得到高产纳他霉素的工程菌; 4.对高产菌株的产量进行测定和分析。 结果 1.成功构建了纳他霉素生物合成途径酮脱氢酶的过量表达载体; 2.将过量表达酮脱氢酶的载体转化至利迪链霉菌A02中,并通过PCR和Westernblot等技术证实了酮脱氢酶的过量表达; 3.通过优化培养条件,筛选出产量较高的工程菌株; 4.高产工程菌株的纳他霉素产量较原始菌株提高了30%左右。 结论 通过基因工程技术选育,得到了利迪链霉菌A02高产纳他霉素的工程菌,其产量较原始菌株提高了30%左右。这为进一步提高纳他霉素产量提供了有力支持。