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淇河鲫生长激素全长cDNA的克隆、序列分析及真核表达的综述报告 淇河鲫(Carassiusauratus)是一种重要的经济鱼类,其生长发育是养殖业中至关重要的问题。生长激素(Growthhormone,GH)是控制动物生长发育的关键激素之一,因此淇河鲫的生长激素研究具有重要意义。本文将对淇河鲫生长激素全长cDNA的克隆、序列分析及真核表达进行综述。 淇河鲫生长激素全长cDNA的克隆 1993年,郭田阳等人首次报道了淇河鲫生长激素基因(GH)的克隆和序列分析。研究表明,淇河鲫GH基因全长为2.58kb,包含5个外显子和4个内含子,编码为214个氨基酸残基的前体蛋白。该前体蛋白含有一个信号肽,一个成熟肽以及两个卡介素核心抑制蛋白(KIP)片段。这一研究为淇河鲫生长激素的功能研究奠定了基础。 1997年,杨连顺等人对淇河鲫生长激素的启动子区进行了研究,并首次克隆了淇河鲫前驱生长激素基因(preGH)cDNA。研究发现,淇河鲫preGH基因全长为1508bp,包含一个信号肽和一个成熟肽。与郭田阳等人的研究相比,这些结果表明淇河鲫生长激素RNA前体序列具有一定的物种多样性。 2001年,林慧敏等人从淇河鲫脑下垂体组织中克隆了生长激素受体(GHreceptor,GHR)基因cDNA,并对其进行了序列分析。研究发现,淇河鲫GHR基因全长为3553bp,包含一个开放阅读框(ORF),编码为638个氨基酸残基的蛋白。该蛋白包含一个跨膜区和一个胞外结构域,与其他物种的GHR基因高度同源。 淇河鲫生长激素全长cDNA的序列分析 淇河鲫生长激素基因序列中包含一个GH结构域和一个C端域,其中GH结构域是生长激素家族成员所共有的保守结构域,包含了两个半胱氨酸桥和一个反向簇形的α-螺旋,这些结构对生长激素的生物活性和稳定性具有重要作用。C端域是与生长激素前驱蛋白信号肽有关的部分,其中也包含了两个半胱氨酸桥。 淇河鲫生长激素受体基因序列包含一个解离构象域(dissociationdomain,DD),一个跨膜域(TM),一个胞外结构域(extracellulardomain,ECD)以及一个细胞内区域。ECD是与生长激素结合的部分,包含了两个粘附区域和一个类球蛋白区域。其它物种的GHR基因结构与淇河鲫基因结构大致相似。 淇河鲫生长激素在真核细胞中的表达 淇河鲫生长激素在真核细胞中的表达研究针对的主要是其启动子区和启动子区中的一些调控元件。1997年,杨连顺等人构建了一个性别特异的淇河鲫生长激素启动子区解释子报告系统,并用来研究生殖相关激素对淇河鲫生长激素启动子活性的影响。研究发现,雄性淇河鲫生长激素启动子活性明显高于雌性鱼。 2013年,徐开华等人报道了淇河鲫生长激素基因启动子区的甲基化谱系,并发现雌性淇河鲫生长激素基因启动子区具有更高的甲基化水平,这与前人研究的结果相符。此外,研究还表明了雄性淇河鲫生长激素基因启动子区中存在大量的CpG二甲基化位点,而这些位点与生长激素启动子区的功能及鱼类生长发育具有关联。 总结 淇河鲫生长激素基因和生长激素受体基因的克隆和序列分析为深入研究淇河鲫生长发育机制提供了基础资料。之后的研究进一步阐明了淇河鲫生长激素基因启动子区的调控机制及其与甲基化谱系和性别特异表达的关系。这些研究为淇河鲫的育种、养殖和增产提供了理论依据。