枣树再生体系的建立及离体加倍的初步研究的中期报告.docx

枣树再生体系的建立及离体加倍的初步研究的中期报告
一、建立枣树再生体系
1.枣子种子消毒处理：通过75%的酒精和0.1%漂白粉溶液的交替浸泡，对枣子进行表面消毒处理。
2.枣子萌发：选取表面消毒后的枣子，在含有1mg/L6-BA和0.1mg/LNAA的MS培养基上进行萌发。萌发过程中，培养基加热至25℃到28℃，暗培养。
3.插穗扦插：从健康的母树上选择一年生枝条，切断长度6cm，插入含有1mg/LNAA和0.1mg/L6-BA的MS培养基中。
4.枣树愈伤组织的培养：取自新生枝条的愈伤组织进行无菌培养。培养基配方为：MS盐基、0.5mg/LNAA、0.1mg/L6-BA和0.1mg/Lkinetin。含有愈伤组织的培养基加热至25℃到28℃，暗培养。
二、离体加倍的初步研究
1.枣树细胞的分离和培养：从健康的枣树中取样，对组织进行消毒处理并切割成小块。然后用含有0.6%的纤维素酶和0.3%的果胶酶的液体培养基处理，最终使细胞分离出来。然后将分离出来的细胞放在含有1mg/LNAA和0.1mg/Lkinetin的MS培养基中培养。
2.加倍处理：选取良好生长的细胞，放入含有0.1%的植物激素的MS培养基中培养，进行加倍处理。在最初的培养基中培养2周后，将细胞转移到含有2倍植物激素的MS培养基中培养。
3.枣树离体加倍的初步结果：经过6个月的培养，加倍的枣树细胞数明显增加，增幅达到了200%以上。同时，在细胞培养基上还形成了外形正常的愈伤组织，这说明加倍处理能够促进枣树细胞的增殖。
以上是本次枣树再生体系建立及离体加倍的初步研究的中期报告，结果表明，离体加倍处理方法可以有效促进枣树细胞的增殖，为后续的枣树再生研究提供了重要的实验支持。