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金刚藤抗肝纤维化作用的实验研究的中期报告 本次实验旨在探究金刚藤提取物对肝纤维化的治疗作用及其可能的机制。实验中我们采用了体内模型和体外细胞实验,并进行了中期报告。 一、体内模型实验 实验对象:雄性C57BL/6小鼠 实验流程: *组A(正常对照组):正常饮食+注射生理盐水; *组B(模型组):高脂饮食+二甲基二硫醚(DMN)注射; *组C(低剂量金刚藤组):高脂饮食+DMN注射+低剂量(100mg/kg)金刚藤提取物灌胃; *组D(中剂量金刚藤组):高脂饮食+DMN注射+中剂量(200mg/kg)金刚藤提取物灌胃; *组E(高剂量金刚藤组):高脂饮食+DMN注射+高剂量(400mg/kg)金刚藤提取物灌胃。 实验结果: 1.体重变化:高脂饮食和DMN注射后,小鼠体重增加,但金刚藤组体重增加幅度较低。 2.血清生化指标:金刚藤提取物能显著降低肝纤维化小鼠的血清转氨酶(ALT、AST)水平,且呈剂量依赖性。 3.病理学变化:金刚藤提取物组织学表现比模型组更为正常,纤维化程度明显降低。 二、体外细胞实验 实验对象:HSC-T6细胞 实验流程: *对照组:无处理; *模型组:添加TGF-β1诱导剂; *低剂量金刚藤组:TGF-β1诱导剂+低剂量(25μg/mL)金刚藤提取物; *中剂量金刚藤组:TGF-β1诱导剂+中剂量(50μg/mL)金刚藤提取物; *高剂量金刚藤组:TGF-β1诱导剂+高剂量(100μg/mL)金刚藤提取物。 实验结果: 1.细胞活性:金刚藤提取物对HSC-T6细胞的生长没有明显影响。 2.病理生化指标:金刚藤提取物可以显著下调TGF-β1诱导的细胞中Ⅰ型胶原质、MMP-2和TIMP-1mRNA的表达,且呈剂量依赖性。 3.免疫荧光指标:金刚藤提取物能显著抑制TGF-β1诱导下Ⅰ型胶原质的蛋白表达,且呈剂量依赖性。 综上所述,金刚藤提取物在体内模型和体外细胞实验中均显示出抗肝纤维化的作用,可能机制是通过抑制TGF-β1诱导的HSC-T6细胞中Ⅰ型胶原质和TIMP-1的表达。需进一步深入研究,确定金刚藤提取物的有效成分及其抗肝纤维化的作用机制。