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耐Cd细菌的筛选及抗性机理研究的综述报告 一、引言 重金属污染对生态环境的破坏影响越来越大,在重金属污染治理中,微生物是一种重要的解决途径。镉(Cd)是一种广泛存在于自然中或工业生产中的重金属,常见于锌冶炼、化肥、制药、电子等工业领域。Cd具有强毒性,对动植物和人类都有危害,被世界卫生组织(WHO)列为一级致癌物质。因此,耐Cd细菌的研究对于解决重金属污染问题具有重要的意义。 二、筛选方法 为了筛选具有耐Cd功能的细菌,常用的方法包括富集培养和快速筛选法。 1.富集培养法 富集培养法是一种通过增加Cd的浓度来诱发耐受性的方法。在富集培养基中加入CdCl2,让微生物在逐渐增加的Cd浓度下生长。通过多次培养,筛选出与对照组相比,具有明显生长差异的细菌,从中筛选出具有耐Cd功能的细菌。 2.快速筛选法 快速筛选法是利用Cd对细胞膜的侵蚀作用,测定细菌膜透性或细胞存活率的变化来快速筛选出具有耐Cd功能的细菌。例如,可以使用荧光染料SYTO9和PI染色技术,通过比较不同处理组细菌的活性荧光体积计算出细菌存活率。 三、耐Cd机理研究 1.细胞外结构 一些细菌通过分泌胞外蛋白或聚糖物质,将Cd结合到细胞外,从而降低细胞内Cd浓度,达到耐受Cd的目的。例如,一种产生胞外多糖的细菌Keissierellasp.S2具有较高的Cd耐受性,这种多糖可以结合Cd离子,将其沉淀在胞外。 2.细胞内结构 细胞内的还原剂对于Cd的耐受性影响非常重要。某些可产生硫酸盐还原酶的细菌可以利用硫酸盐还原过程将Cd还原成CdS或CdSe等无毒物质,这样细胞内Cd浓度会降低,从而达到耐受Cd的目的。根据文献报道,一些可以产生硫酸盐还原酶的细菌如Desulfomicrobiumsp.和Bacilluscereus可以以较高的Cd浓度存活。 3.胞内剪切力 胞内蛋白对细胞内Cd的转运和代谢也有重要的作用。某些细菌可以利用胞内分子粘度变化产生的剪切力,将Cd通过胞膜中的质子转移酶或离子通道转移至细胞外环境。 4.吸附作用 一些细菌具有较强的吸附能力,可以将Cd吸附在胞外或胞内。例如,Pseudomonassp.可以产生一种含有羰基和羟基的生物胶体,这种胶体可以结合Cd离子,从而达到耐受Cd的目的。 5.酶系统 一些细菌可以利用细胞内酶系统代谢Cd,例如利用谷胱甘肽还原酶、超氧化物歧化酶和过氧化物酶等,将Cd还原成CdS或CdSe等无毒物质。 四、结论 综上所述,耐Cd细菌的筛选和机理研究取得了令人瞩目的进展。未来的研究方向可以是提高筛选方法的便捷性和准确度,同时进一步研究细菌的抗性机理以提高细菌耐受Cd的能力。