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以小鼠乳腺细胞为主要模型研究诱导重编程中的过程及机制的中期报告 本研究旨在通过以小鼠乳腺细胞为主要模型,研究诱导重编程中的过程和机制。本报告主要介绍了研究的中期进展情况。 研究方法: 本实验使用了非病毒型质粒pMXs-Oct3/4,Sox2,Klf4和pCMV-VSVG进行诱导重编程。诱导重编程过程中,首先需要从小鼠乳腺细胞中分离出单个细胞,然后加入质粒,通过培养等方式进行转染。经过一段时间的培养,形成克隆。最终通过形态学、遗传学、免疫荧光染色及基因组学等方法进行诱导重编程效果的鉴定。 研究结果: 1.成功构建了诱导重编程小鼠乳腺细胞模型,成功转染并形成了克隆。 2.通过形态学及遗传学方法,证明诱导重编程小鼠乳腺细胞模型具有类似于干细胞的表型。 3.通过免疫荧光染色,证明诱导重编程小鼠乳腺细胞模型表达克隆特异性标记物Nanog、Sox2、Oct4等。 4.通过基因组学方法,发现了在诱导重编程过程中发生了大量基因的差异表达,其中包括与细胞增殖、细胞分化和细胞命运决定等多个方面相关的基因。 结论: 通过对小鼠乳腺细胞模型的诱导重编程实验,发现诱导重编程可以将其转化为表型类似于干细胞的细胞。同时,诱导重编程会引起大量基因的差异表达,这些基因与细胞增殖、细胞分化和细胞命运决定等多个方面相关。还需要进一步深入研究这些差异表达基因的作用机制,为深入理解诱导重编程提供基础。