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异源四倍体鲫鲤BAC文库的构建及其功能基因的遗传变异分析的中期报告 在本研究中,我们对异源四倍体鲫鲤进行了BAC文库的构建,并对文库中的功能基因进行了遗传变异分析。具体工作如下: 一、BAC文库的构建 1、DNA提取 我们从异源四倍体鲫鲤体内提取高品质的基因组DNA,以作为构建BAC文库的模板。提取DNA的方法基于常规的CTAB法。 2、BAC文库构建 我们采用标准的BAC克隆构建方法,将DNA片段克隆至BAC载体中,并通过电穿孔法将BAC克隆子导入大肠杆菌DH10B中。经过筛选和检验,我们共得到了100,000个BAC克隆子。 二、功能基因的遗传变异分析 1、文库筛选 我们首先对BAC文库中的克隆子进行筛选,选择与鲫鲤气候适应有关的功能基因克隆子作为研究对象。 2、克隆子测序 我们使用Sanger测序技术对选定的BAC克隆子进行测序,得到了序列信息。 3、基因注释 我们使用BLAST和其他基因注释工具对序列信息进行注释,鉴定其中的功能基因。 4、遗传变异分析 我们获取了不同鲫鲤品系的基因序列,并对不同品系之间的基因序列进行对比分析,检测其遗传变异信息。 目前,我们已经完成了BAC文库的构建和部分克隆子的测序和遗传变异分析工作,我们将继续进行后续工作,包括完整的文库筛选和更多基因的测序和遗传变异分析。该研究有望为鲫鲤的气候适应研究提供新的数据和证据。