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副溶血弧菌ELISA检测方法的建立及初步应用的综述报告 副溶血弧菌是一种常见的食源性细菌,常存在于海产品中,特别是生鲜或未彻底加热的海鲜。副溶血弧菌污染的食品会引起人类急性肠道疾病,如副溶血弧菌肠炎和副溶血弧菌性胃肠炎等。副溶血弧菌的检测已成为海产品质量管理和食品安全保障中不可或缺的步骤。 传统的副溶血弧菌检测方法包括培养基培养法和PCR技术。然而,培养基培养法需要长时间的培养过程和较高的技术要求,而PCR技术虽然可以提高检测的准确性和速度,但对设备和操作人员要求较高,且存在高价值的反应体系和耗材成本等问题。因此,开发一种准确、快速、简便和成本低廉的副溶血弧菌检测方法具有重要的意义。 ELISA技术由于其高度的专一性和敏感性,被广泛应用于食品中的细菌和病毒等生物标志物的检测。近年来,基于ELISA的副溶血弧菌检测方法逐渐受到重视。本文综述了副溶血弧菌ELISA检测方法的建立及初步应用的研究进展。 ELISA检测方法的建立需要先制备特异性的单克隆或多克隆抗体。对于副溶血弧菌,研究人员制备了多种抗体,包括单克隆和多克隆抗体。建立的ELISA检测方法一般包括间接ELISA、夹心ELISA和竞争ELISA等类型。 间接ELISA是将检测的样品中的副溶血弧菌代表性抗原(如表面蛋白)与预先固定在酶标板上的特异性抗体结合,然后用另一种羊抗鼠抗体与酶标签结合,形成反应产物。夹心ELISA则是将大肠杆菌羧基肽酶(TMB)标签特异性抗体固定在酶标板孔中,用样品中存在的副溶血弧菌代表性抗原与之反应,然后加入固相抗体和TMB底物液进行检测。在竞争ELISA中,血清或抗原样品中的特异性抗原和表面蛋白与预先固定在酶标板上的抗原结合,与TMB等底物反应使酶标记的抗体与酶标板产生颜色变化。 在对副溶血弧菌ELISA检测方法的研究中,值得一提的是Nair等人开发了一种基于夹心ELISA的便携式检测装置,能够在15分钟内检测出样品中的副溶血弧菌,具有高度的敏感性和特异性,并且易于操作和移动,适用于野外环境中的食品安全检测。 总之,副溶血弧菌ELISA检测方法的建立及初步应用为海产品的质量管理和食品安全保障提供了一种准确、快速、简便、低成本的检测手段。通过不断改进和优化,其性能还将得到进一步提高和发展。