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牛粪静态好氧堆肥中反硝化细菌群落结构的研究的开题报告 一、研究背景及意义 随着农业生产的发展,农村大量产生有机废弃物,其中包括很多动物的粪便。传统的农业习惯是直接将养殖废弃物倒在田地上堆积,使得有机物变质和分解的速度比较慢,导致废弃物的积压和环境污染。此外,堆放大量的废弃物还会影响周围的环境,引起异味和噪音等问题。相对而言,利用堆肥来处理这些有机废弃物可能是更优秀的解决方法。 堆肥过程中,反硝化细菌群落结构的变化直接反映出堆肥微生物的活性和堆肥的品质。反硝化是一种重要的氧化还原过程,可以将硝酸盐还原成氮气释放到空气中,不仅可以减少环境中的硝酸盐含量,还可以增加废弃物的肥力。 因此,本研究的主要目的是调查在牛粪静态好氧堆肥的过程中,反硝化细菌群落的种类及数量的变化。这将有助于掌握处理有机废弃物的堆肥技术,在减少环境污染的同时,提高废弃物的资源化利用和农业生产效率。 二、研究内容和方法 1.研究内容 本研究将对牛粪静态好氧堆肥过程中的反硝化细菌群落结构进行分析和研究。主要包括以下方面: (1)样品采集:从不同时间点采集堆肥样本,分别用作DNA提取和测定堆肥物理化学指标。 (2)DNA提取:采用CTAB法将DNA从样本中提取出来,并进行纯化处理,保留高质量的DNA。 (3)PCR扩增:针对反硝化细菌群落的16SrRNA基因序列,扩增出目标基因片段。 (4)测序和分析:采用IlluminaMiSeq平台对扩增的16SrRNA基因进行测序,并依据模式和距离将序列进行分类归类。 2.研究方法 本研究采用分子生物学技术分析牛粪静态好氧堆肥过程中反硝化细菌群落的变化。主要方法包括: (1)样品采集:在堆肥中选择代表性的样本进行采集,包括不同时间点和不同位置。 (2)DNA提取:选择CTAB法进行提取,同时利用吸附柱进行纯化和浓缩处理,确保提取出的DNA纯度和浓度达到要求。 (3)PCR扩增:利用PCR扩增靶向反硝化细菌群落的16SrRNA基因,选择适当的引物和条件进行扩增,得到目标基因片段。 (4)测序和分析:利用高通量测序平台进行测序,将16SrRNA基因序列分析并分类,得到反硝化细菌群落的多样性和组成等信息。 三、研究预期成果 通过本研究,我们将得到以下预期成果: 1.牛粪静态好氧堆肥过程中反硝化细菌群落的多样性和组成信息。 2.分析环境因素对反硝化细菌多样性和组成的影响。 3.探究反硝化细菌对堆肥质量形成的影响,为堆肥处理技术的改进和优化提供基础依据。 四、参考文献 1.陈嘉瑶,黄进辉.堆肥中反硝化细菌的多样性[J].微生物工程,2006,23(3):120-123. 2.刘亚男,秦伯强,胡毓芳,等.废水对好氧堆肥中反硝化菌群落的影响[J].生态学杂志,2009,28(5):993-999. 3.杨秋生,宋贵昊,秦思义,等.沼液再生堆肥中反硝化细菌的多样性及其演移[J].微生物学报,2013,53(4):482-489. 4.郑亮,邱雁梅,罗旭,等.堆肥微生物菌群结构及其环境因素分析[J].应用生态学报,2016,27(12):3951-3959. 5.ChénierM,BeaumierD,RoyR,etal.Microbialcommunitystructureandcellulosedecompositioninvermicompostingofsheepmanuremixedwithspentmushroomsubstrate[J].WorldJournalofMicrobiology&Biotechnology,2014,30(2):677-686.