体外受精和早期胚胎培养ppt课件.ppt

3.2体外受精和早期胚胎培养一、试管动物技术一、试管动物技术
1.概念:指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。
2.对象：动物配子或早期胚胎。
3.应用的技术：体外受精、早期胚胎的培养和胚胎移植。
4.意义：实现优良种畜的快速大量的繁殖。二、体外受精
概念：指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术；
包括⑴卵母细胞的采集
⑵精子的获能
⑶获能精子和卵细胞的受精。㈠卵母细胞的采集和培养:
1.采集方法：
⑴小型动物如鼠、兔，以及家畜猪、羊等常采用超数排卵法，使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取
⑵大型动物如牛：①从已屠宰母畜卵巢中采集卵母细胞②从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞（超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等。
2.采集后培养方法:
①从输卵管中冲取的卵子可直接与获能的精子在体外受精;
②从卵巢中采取的卵母细胞需要在体外人工培养成熟后才能与获能精子受精.2.获能处理：
①培养法:即将取自附睾的精子,放入人工配置的获能液中,培养一段时间后,精子即可获能。
适用于：啮齿动物、家兔和猪等
②化学诱导法：适用于牛、羊等家畜
即将精子放在一定浓度的肝素或Ga2+载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能。
3.受精：获能的精子和培养成熟的卵子，在获能溶液和专用的受精溶液中完成受精过程。在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。概括受精过程:三、胚胎的早期培养：
1.培养液成分：（两盐、两素、两酸、血清）
水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清
⒉培养液作用：用于受精卵的继续培养，以检查受精情况和受精卵的发育能力。

3.胚胎去向目前由于无法进行全体外胚胎培养，胚胎移植成为胚胎工程中获得后代的唯一方法。四、胚胎移植
1.概念：
指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术
2.理解
⑴胚胎来源：
①雌性动物体内的早期胚胎
②通过体外受精和早期胚胎的培养获得
③通过哺乳动物体细胞核移植及培养获得
④通过转基因技术获得的胚胎⑵对受体的要求：
①同一物种的雌性动物
②与供体处于相同的生理状态
⑶实质：生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。
⑷地位：是胚胎工程的最后一道工序。
（供体：提供胚胎的个体；受体：接受胚胎的个体；受体的条件：同种、生理状态相同)
胚胎移植的基本程序（2）采集卵母细胞
方法：超数排卵
具体做法：
注射促性腺激素（5）对胚胎进行质量检查
胚胎发育到桑椹胚或囊胚选择3.胚胎移植的基本程序4.胚胎移植的生理学基础
①同种动物排卵后，不管是否妊娠，一段时间内供受体生殖器官的生理变化时相同的
为移入的胚胎提供了相同的生理环境；
②早期胚胎处于游离状态
为胚胎的收集提供了可能；
③受体对移入子宫的胚胎不发生免疫排斥
是胚胎存活的条件；
④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但其遗传物质不受影响。思考与讨论准备移植的胚胎，移植到任何一头动物子宫内都能发育吗?
胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进行，因为同种动物之间的生理特征相近，进行胚胎移植易于成功。能否直接从母体子宫内进行胚胎收集?为什么？
能。因为哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态。2.胚胎移植成功与否的条件有哪些?思考与讨论:
1、在胚胎移植操作中，怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致？例如，供、受体的发情时间要一致吗？供体胚胎移入受体子宫的位置，应与在供体内的位置相同或相似吗？2、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。你认为这样的概括正确吗？
正确。5.胚胎移植的意义：
①充分发挥了雌性优良个体的繁殖潜力
（缩短了供体本身的繁殖周期，增加了供体一生繁殖后代的数量）
②加速育种工作和品质改良
③一胎多产
④保存品种资源和濒危物种
⑤大量节省购买种畜的费用胚胎分割2.特点：
来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质（因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一）
3、理论基础
动物胚胎细胞的全能性。
物质基础：
每个细胞核具有相同的遗传物质
4.胚胎分割的时期为：
囊胚或桑椹胚。4、选择的胚胎：
发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。
5、使用的主要仪器：
实体显微镜和显微操作仪。
6、具体操作
用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中，或直接将裸半胚移植给受体。7、操作注意事项：
①对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割。
目的：有利于分割后的胚胎的恢复和进一步发育。
原因：内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细