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抗真菌几丁质酶基因克隆及非洲菊遗传转化研究的任务书 任务书 任务名称:抗真菌几丁质酶基因克隆及非洲菊遗传转化研究 任务主要内容:本课题旨在克隆具有抗真菌能力的几丁质酶基因,并研究非洲菊遗传转化技术,为非洲菊的高效育种和抗病育种提供新的手段。 任务分工: 1.收集相关文献资料并进行综述,确定几丁质酶基因的克隆策略和非洲菊遗传转化的研究方法。 2.从非洲菊中提取RNA,并利用RT-PCR技术进行几丁质酶基因的扩增并进行序列分析。 3.将克隆得到的几丁质酶基因进行原核表达及亚细胞定位研究。 4.构建非洲菊遗传转化质粒,并利用农杆菌介导的遗传转化技术进行转化。 5.进行经过遗传转化的非洲菊的抗真菌能力补体实验,并对转化植株进行对照试验。 6.对遗传转化非洲菊的基因表达情况和遗传稳定性进行分析。 任务进度安排: 第一年: 1.收集相关文献资料并进行综述,确定几丁质酶基因的克隆策略和非洲菊遗传转化的研究方法。 2.从非洲菊中提取RNA,并利用RT-PCR技术进行几丁质酶基因的扩增并进行序列分析。 第二年: 3.将克隆得到的几丁质酶基因进行原核表达及亚细胞定位研究。 4.构建非洲菊遗传转化质粒,并利用农杆菌介导的遗传转化技术进行转化。 第三年: 5.进行经过遗传转化的非洲菊的抗真菌能力补体实验,并对转化植株进行对照试验。 6.对遗传转化非洲菊的基因表达情况和遗传稳定性进行分析。 任务预期成果: 1.完成几丁质酶基因的克隆和序列分析,通过亚细胞定位研究和原核表达分析,探究几丁质酶对非洲菊的真菌抗性作用机制。 2.成功构建非洲菊遗传转化质粒,并证实转化产生了抗真菌性状,表明该技术可用于非洲菊的高效育种和抗病育种。 3.系统分析遗传转化非洲菊的基因表达情况和遗传稳定性,为其后续的功能基因研究和功能验证提供支持。 任务所需资源: 1.实验室设施:本课题需要配备PCR仪、蛋白质电泳仪、Gel文档、荧光显微镜、植物遗传转化系统等实验室设备。 2.材料资源:需要大量非洲菊供试验,天然产生的真菌也必须配备充足。 3.人员配备:至少需要一名老师和两名博士研究生。 4.资金支持:课题组获取至少20万元的科研经费,并尽可能争取更多的资金支持。 任务考核标准: 1.本次任务完成后,需撰写一份包含研究方法、结果及相应结果分析研究论文。 2.团队成员应能够有效地合作协作,保证任务按时达成。 3.任务完成后要进行生物安全评估和审查,并按照实验室规定处理废弃物。 4.参与讨论、展示实验并出席论坛或会议进行交流。