基于SRAP和ISSR的山野豌豆种质资源遗传多样性分析的开题报告.docx

基于SRAP和ISSR的山野豌豆种质资源遗传多样性分析的开题报告
一、研究方案的选题背景
山野豌豆是豆科植物，常见于我国北方山区和高寒地带。山野豌豆具有营养丰富、味道鲜美、润肺止咳的药用价值，又具有改善耐寒性、抗逆性及提高内源激素水平等多重生物学特性，是国内外育种人员广泛关注的重要经济作物。然而，山野豌豆野生种质资源独特而丰富，但基础研究薄弱，其遗传多样性的鉴定和保护亟待开展。
二、研究目的及意义
本研究旨在利用SRAP和ISSR技术对山野豌豆种质资源的遗传多样性进行分析，对山野豌豆种质资源的种间遗传关系、种内遗传多样性和遗传结构的组成进行研究，为山野豌豆的资源开发和遗传改良提供有效的科学依据，同时也为野生豌豆的保护提供重要的借鉴意义。
三、研究方法及技术路线
1.材料的准备和筛选
从我国北方山区收集150份山野豌豆种质资源，按照不同自然界分类进行筛选，挑选20份反映不同地域和种群的豌豆品种进行分析。
2.SRAP技术的分析
设计SRAP引物对筛选豌豆进行聚类分析。
3.ISSR技术的分析
设计ISSR引物对豌豆进行聚类分析。
4.数据分析
采用Treecon软件，基于Nei遗传距离构建系统进化树，采用Powermarker软件进行遗传结构分析；SPSS软件进行聚类分析。
四、预期研究结果
本研究预期将获得下列结论：
1.SRAP和ISSR标记可以成功应用于山野豌豆的遗传多样性分析。
2.山野豌豆遗传多样性相对较高，不同品系间存在明显的遗传多样性差异。
3.山野豌豆种群分化明显，地域分布会对豌豆种质资源的遗传多样性产生影响。
4.可通过遗传多样性分析，为山野豌豆的资源开发和种质共享提供重要依据。
五、预期成果
1.发表国内外期刊论文1-2篇
2.参加相关会议并作报告1-2次
3.为山野豌豆的遗传多样性研究提供依据和数据支撑
4.撰写山野豌豆种质资源遗传多样性分析的学位论文
六、研究时间安排
第一年：
1.整理文献，设计试验内容和方案，确定SRAP和ISSR引物
2.采集150份山野豌豆种质资源，筛选20个豌豆品种用于遗传多样性分析
3.制备SRAPPCR反应体系，优化PCR反应条件；ISSR引物聚合酶连锁反应（PCR）及后续处理方法的优化
第二年：
1.SRAP和ISSR引物分离和纯化
2.SRAPPCR产物的扩增和检测，并筛选优异谱带以及ISSR扩增的基带
3.数据的分析和处理
第三年：
1.数据的统计分析，进化树的构建和遗传结构的组成分析
2.遗传距离的分析，遗传多样性指数的计算
3.总结和撰写论文
七、参考文献
1.Yuan,J.S.,Wang,Y.F.,Ji,Z.R.,etal.(2002).ThegeneticdiversityofwildSoybean(Glycinesoja)populationfromvariouslatitudinalgradientsinEasternAsia.TheorApplGenet:102,15-21.
2.吴济良.植物分子遗传学实验原理与技术：高等教育出版社，2002年。
3.柴文强.作物遗传多样性分析：农业出版社，2012年。