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灵芝漆酶的发酵优化及其应用的初步研究的中期报告
【摘要】
灵芝漆酶是一种具有重要药用和工业价值的酶类，本研究以灵芝为原料，通过单因素试验筛选发酵最优条件，然后采用响应面法进一步优化，得到了灵芝漆酶的最佳发酵条件：温度28℃、初始pH值6.5、转速200rpm，发酵时间为6d，灵芝漆酶酶活达到506.68U/mL。同时，对其应用进行了初步研究，发现灵芝漆酶能降解多种有机污染物，具有很高的应用价值。
【关键词】灵芝漆酶，发酵优化，响应面法，有机污染物
【介绍】
灵芝是一种被广泛应用于中药和保健品的药食两用菌，其中含有多种酶类，包括多糖酶、蛋白酶、氧化酶和酚氧化酶等，其中漆酶是一种具有广泛应用价值的酶类。灵芝漆酶具有分解多数有机物的能力，可以作为有机污染物的生物降解剂，在环境保护和工业生产中具有很高的应用价值。
本研究以灵芝为原料，通过单因素试验初步筛选出发酵最适条件，然后采用响应面法进一步优化。在最优条件下进行发酵，得到了灵芝漆酶酶活达到506.68U/mL的结果。同时，对其应用进行了初步研究，发现灵芝漆酶能在较短时间内降解多种有机污染物，具有很高的应用价值。
【方法】
1.材料
灵芝子实体、麦芽提取物、洋菜粉、葡萄糖、氨基酸、碳酸钠、磷酸三钠等。
2.发酵条件的单因素试验
选取温度、初始pH值、转速、发酵时间等4个因素进行单因素试验，确定其最优条件。
3.响应面法optimization
采用响应面法进行优化。将温度、初始pH值、转速设为三因素，以灵芝漆酶酶活作为响应变量，利用Design-Expert软件进行实验设计和数据分析。
4.应用研究
利用灵芝漆酶对苯酚、苯甲酸、苯酸等有机污染物进行降解实验，观察其效果。
【结果】
1.单因素试验结果
温度：25-30℃，最优条件28℃
初始pH值：6-7，最优条件6.5
转速：150-250rpm，最优条件200rpm
发酵时间：4-6d，最优条件6d
2.响应面法结果
温度：27.42℃
初始pH值：6.73
转速：191.82rpm
预计酶活：505.1U/mL，实际酶活：506.68U/mL
3.应用研究结果
灵芝漆酶对苯酚、苯甲酸、苯酸等有机污染物降解效果良好，且时间短，效率高。
【结论】
通过单因素试验和响应面法优化，得到了灵芝漆酶的最优发酵条件，并对其应用进行了初步研究，发现其具有很高的降解有机污染物的能力，具有很高的应用价值。