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Bit-1在口腔鳞状细胞癌侵袭、转移及凋亡中作用的初步研究的开题报告
一、研究背景
口腔鳞状细胞癌（OSCC）是口腔常见的一种恶性肿瘤。其侵袭、转移及凋亡过程一直是肿瘤研究领域的重点。Bit-1（BCL-2inhibitoroftranscription-1）是一种新发现的凋亡抑制因子，其在多种恶性肿瘤中的作用已受到广泛关注。然而，关于Bit-1在OSCC中的作用仍存在许多疑惑。
二、研究目的和意义
本研究旨在探究Bit-1在OSCC侵袭、转移及凋亡中的作用及其机制，以期为新药的研发提供理论基础，并为口腔肿瘤的治疗提供新思路和方法。
三、研究内容和方法
（一）研究内容
1.检测Bit-1在OSCC组织中的表达情况，比较其与正常组织的差异；
2.利用体外细胞实验方法，探究Bit-1对OSCC细胞增殖、凋亡及侵袭、转移的作用；
3.建立Bit-1敲除OSCC细胞模型，检测Bit-1的敲除对OSCC细胞的影响；
4.分析Bit-1在OSCC中的潜在作用机制。
（二）研究方法
1.免疫组织化学法（IHC）检测Bit-1在OSCC组织中的表达情况；
2.细胞增殖、凋亡、侵袭、转移实验；Westernblot方法检测相关蛋白表达情况；
3.CRISPR-Cas9基因编辑技术建立Bit-1敲除OSCC细胞模型；
4.RNA测序技术和生物信息学分析技术分析Bit-1在OSCC中的调控网络。
四、研究预期结果
（一）从分子水平证明Bit-1在OSCC中的高表达情况与其侵袭、转移及凋亡有关；
（二）证明Bit-1敲除可能抑制OSCC细胞的增殖、促进其凋亡，并抑制其侵袭、转移能力；
（三）探究Bit-1在OSCC中的作用机制，为新药的研发提供提供理论基础。
五、研究进度和计划
研究将在一年内完成，计划如下：
1.第一季度：收集OSCC组织样本，进行IHC检测，确定Bit-1在OSCC中的表达情况；
2.第二季度：进行体外实验，研究Bit-1对OSCC细胞增殖、凋亡、侵袭、转移的作用；
3.第三季度：利用CRISPR-Cas9技术建立Bit-1敲除OSCC细胞模型，检测其对OSCC细胞的影响；
4.第四季度：进行RNA测序和生物信息学分析，探究Bit-1在OSCC中的调控网络。
六、研究存在的困难和解决方法
目前还没有针对Bit-1在OSCC中的作用和机制的深入研究，相关文献资料较为缺乏。另外，检测OSCC组织样本的获取难度较大，而且其凋亡和侵袭转移机制极为复杂。针对以上困难，我们将通过广泛查阅资料，与其他研究人员交流讨论来摸索解决途径。在样本获取方面，我们将通过与医院合作和患者取得联系来获取样本。在实验设计方面，我们将采用多重手段来验证研究结果。
七、参考文献
1.YangX.etal.(2018).Bit-1PromotesCellGrowthandMigration,andInhibitsApoptosisinColorectalCancerCellsthroughFAKandAktPathways.ScientificReports8(1):3748.
2.MaksoudS.(2019).BCL-2inhibitoroftranscription1(BIT1)incancerbiology.TumorBiology9:1010428319883625.
3.LiC.etal.(2019).IncreasedBCL-2inhibitoroftranscription1expressionpredictspoortumorstageandclinicaloutcomeinepithelialovariancancer.CancerScience110(1):357-366.