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人法尼酯X受体基因转录调控的研究的任务书
任务书：
题目：人法尼酯X受体基因转录调控的研究
一、任务背景及意义：
法尼酯X受体（FXR）是一种核受体，在肝脏、肠道、肾脏、胆囊等器官中广泛表达。FXR通过调节胆汁酸代谢、脂质代谢、炎症反应和肝脏再生等生理过程，对机体健康具有重要作用。因此，深入了解人FXR基因的转录调控机制，对揭示FXR功能、阐明肝胆、肾脏等疾病的发生机制，并为开发相应的治疗策略具有重要意义。
二、研究目的：
1.精确定位人FXR基因转录调控区域和启动子序列，探究其转录调控元件的分布、特点及作用。
2.构建FXR启动子活性检测体系，评价调控因子对FXR基因表达的影响。
3.鉴定影响FXR启动子活性的转录调控因子，并深入研究其调控机制。
三、研究内容：
1.分析人FXR基因转录调控区域和启动子序列，并预测涉及其转录调控的元件。
2.构建包含FXR启动子序列的载体，并转染肝细胞系或人腺癌细胞系中进行FXR启动子活性检测，评价转录调控因子的作用。
3.鉴定和筛选影响FXR启动子活性的转录因子，并通过过表达、抑制等方法深入研究其调控机制。
四、研究方法：
1.采用BioMart和UCSCgenomabrowser等网站对人FXR基因上下游调控区域和启动子序列进行分析和预测。
2.构建FXR启动子-reporter载体，并将其转染至人肝癌细胞系HepG2或人腺癌细胞系等中，评价不同转录因子对其启动子活性的影响。
3.通过细胞生物学实验方法，包括共转染、qPCR、Westernblot、ChIP等方法来鉴定和筛选出FXR启动子活性受转录调控因子，并深入研究其调控机制。
五、研究预期结果：
1.精确定位人FXR基因启动子序列及其上下游调控区域，并预测将涉及其转录调控的功能元件。
2.构建FXR启动子-reporter载体及相关评价体系，鉴定影响FXR启动子活性的转录调控因子。
3.深入研究FXR启动子被调控因子的调控机制，为进一步解析FXR的功能和阐明其在多种疾病中的作用机制提供实验依据。
六、参考文献：
1.ZhangY,CastellaniLW,SinalCJ,etal.Peroxisomeproliferator-activatedreceptor-gammacoactivator1alpha(PGC-1alpha)regulatestriglyceridemetabolismbyactivationofthenuclearreceptorFXR[J].Genes&development,2004,18(2):157-169.
2.WangH,ChenJ,HollisterK,etal.EndogenousbileacidsareligandsforthenuclearreceptorFXR/BAR[J].Molecularcell,1999,3(5):543-553.
3.ZhangY,LeeFY,BarreraG,etal.ActivationofthenuclearreceptorFXRimproveshyperglycemiaandhyperlipidemiaindiabeticmice[J].ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,2006,103(4):1006-1011.