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乳糖酶产生菌的分离、鉴定及其基因克隆的研究的中期报告 此项目着眼于分离、鉴定和基因克隆乳糖酶产生菌,至目前为止,我们已经完成了以下工作: 1.样品采集和预处理 我们收集了各种来源的乳制品和发酵产品作为样品,包括酸奶、芝士、牛奶、酸乳、乳清等。经过适当的处理和稀释后,我们使用总菌落计数法进行了菌落计数,以评估样品中乳酸菌数量。 2.乳糖酶活性测定 我们进一步使用碱性杯形比色法检测样品中的乳糖酶活性。结果表明,一些样品中存在明显的乳糖酶活性。 3.乳糖酶产生菌分离和筛选 我们将样品接种到不同的培养基上,以筛选出乳糖酶产生菌,并利用形态学、生理生化和分子生物学方法对其进行鉴定和分类鉴定。通过筛选和鉴定,我们成功地分离了7株乳糖酶产生菌,并对其鉴定结果进行了验证。 4.乳糖酶基因克隆和表达 我们设计了一对特异引物,从乳糖酶产生菌的基因组DNA中扩增出了乳糖酶基因片段。将所得基因片段克隆到表达载体pET28a中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。我们成功地制备出纯化的重组乳糖酶,并进行了酶学性质初步研究。 目前工作仍在进行中,我们将进一步对分离、鉴定和基因克隆的乳糖酶产生菌进行表征和深入研究,以期提高乳糖酶的生产效率和产品质量。