高效液相色谱仪组成及检测器种类.ppt

第三节高效液相色谱仪1.储液瓶（输液管入口端安装有过滤器）；2.高压输液泵；3.混合器和阻尼器；4.进样器（阀）；5.色谱柱；6.检测器；7.废液瓶；8.数据处理和控制系统
HPLC仪器结构示意图首先高压泵将贮液器中流动相溶剂经过进样器送入色谱柱，然后从控制器的出口流出。当注入欲分离的样品时，流经进样器贮液器的流动相将样品同时带入色谱柱进行分离，然后依先后顺序进入检测器，记录仪将检测器送出的信号记录下来，由此得到液相色谱图。一、高压输液系统1.溶剂贮存器
溶剂贮存器一般由玻璃、不锈钢或氟塑料制成，容量为1到2L，用来贮存足够数量、符合要求的流动相。
2.高压输液泵
高压输液泵是高效液相色谱仪中关键部件之一，其功能是将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。高压输液泵，按其性质可分为恒压泵和恒流泵两大类。恒压泵是保持输出压力恒定，而流量随外界阻力变化而变化，如果系统阻力不发生变化，恒压泵就能提供恒定的流量。3.梯度洗脱装置仅用弱溶剂梯度洗脱装置分类二、进样系统通常使用耐高压的六通阀进样装置,其结构如图所示：三、分离系统柱管材料：耐腐蚀耐压
内径：2.0、3.0、4.1、4.6mm
长度：5、10、15、25cm等
固定相：颗粒细、圆、均一、刚性强
.一般在分离前备有一个前置柱，前置柱内填充物和分离柱完全一样，这样可使淋洗溶剂由于经过前置柱为其中的固定相饱和，使它在流过分离柱时不再洗脱其中固定相，保证分离技的性能不受影响。
柱子装填得好坏对柱效影响很大。对于细粒度的填料（＜20μm）一般采用匀浆填充法装柱，先将填料调成匀浆，然后在高压泵作用下，快速将其压入装有洗脱液的色谱柱内，经冲洗后，即可备用。
柱温一般为室温或接近室温。四、检测系统在液相色谱中，有两种类型的检测器：
一类是溶质性检测器，它仅对被分离组分的物理或物理化学特性有响应。属于此类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器等；
一类是总体检测器，它对试样和洗脱液总的物理和化学性质响应。属于此类检测器有示差折光检测器等。㈠紫外光度检测器⒈作用原理
依据被分析试样组分对待定波长紫外光的选择吸收性，组分浓度与吸光率的关系遵守比尔定律。⒉工作过程⒊特点㈡荧光检测器优点：是一种选择性强、灵敏度高，比紫外检测器高23个数量级，可达pg量级或更低，可用于梯度淋洗。
缺点：样品适用范围有限，定量分析的线性范围较窄(104-105)。㈢示差折光检测器㈣电导检测器