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mir-31抑制血管紧张素2诱导的内皮细胞凋亡的作用和机制研究的开题报告
一、研究背景
血管紧张素2（angiotensinII,AngII）是一种具有强烈生物活性的多肽激素，其通过结合AT1和AT2受体而发挥生物学效应。在心血管系统中，AngII被认为是一种具有收缩作用的血管紧张素，并在其对血管的收缩转换和肥大，心血管疾病的发病和进展中发挥关键作用。过量的AngII可通过一系列的代谢途径作用于内皮细胞，引起细胞损伤和凋亡。
MicroRNA-31（mir-31）是一种高度保守的miRNA，其在多个生物过程中发挥重要作用。最近的研究表明，mir-31可能在巨噬细胞的自噬和炎症反应中起着关键作用。在内皮细胞中，mir-31已被发现可以通过抑制AT1R表达而发挥保护作用。然而，关于mir-31是否对AngII诱导的内皮细胞凋亡具有保护作用的研究尚不明确。
因此，本研究旨在探讨mir-31在血管紧张素2诱导的内皮细胞凋亡中的作用和机制。
二、研究内容及方法
1.研究内容
本研究主要探讨mir-31对AngII诱导的内皮细胞凋亡具有保护作用的作用以及其机制。
2.研究方法
（1）细胞培养
使用人乙型肝炎转染病毒（HBV-T）感染的人脐静脉内皮细胞（HUVEC），在DMEM培养基中含有10％胎牛血清下生长，37°C，5％CO2。
（2）细胞治疗
将HUVEC在24孔板中分成4个组，组1：未治疗；组2：AngII（100nM）处理24小时；组3：先前转染pLV-mir-31病毒后，AngII（100nM）处理24小时；组4：先前转染pLV-mir-NC病毒后，AngII（100nM）处理24小时。四个组的细胞均在相同的条件下生长且有同样的细胞数目。
（3）细胞凋亡检测
使用AnnexinV-PI染色法和TUNEL染色法来检测细胞凋亡，评估mir-31对AngII诱导的内皮细胞凋亡的影响。
（4）Westernblotting检测
通过Westernblotting方法，检测HUVEC中相关蛋白的表达，如Caspase3，Bcl-2和Bax。
三、预期结果
本研究通过检测内皮细胞的凋亡率和相关蛋白的表达变化，预计可以得出以下结论：
（1）与未处理组和对照组相比，AngII处理组的内皮细胞凋亡率明显增加；
（2）相对于AngII处理组和空白对照组，mir-31处理组的内皮细胞凋亡率下降；
（3）AngII处理组的Caspase-3蛋白表达升高，Bcl-2和Bax蛋白表达比例发生变化；
（4）相比之下，mir-31处理组的Caspase-3蛋白表达降低，Bcl-2和Bax蛋白表达比例发生变化。
四、研究意义
在目前的研究中，微小RNA是一类热点研究领域。通过深入研究它们的分子机理，将有助于我们更好地了解生物体的生理和病理变化。本研究将有助于进一步理解mir-31在内皮细胞中对血管紧张素2诱导的凋亡的调节作用，提高我们对AngII与心血管疾病发展之间关系的认识。这些研究结果将为开发新的心血管疾病治疗策略提供有用的参考。