鸭坦布苏病毒E蛋白抗原表位的鉴定及Epitope-ELISA诊断方法的建立的开题报告.docx

鸭坦布苏病毒E蛋白抗原表位的鉴定及Epitope-ELISA诊断方法的建立的开题报告
一、选题背景与意义
鸭坦布苏病毒（DuckTembusuvirus，DTMUV）属于禽室黄病毒科，病毒感染泛发于水禽中，特别是对鸭子的影响较大。DTMUV包括四种亚型，分别是CH-1V、GY-1V、ZJ-1V和ZM-1V，并且能够引起水禽中的严重经济损失，如蛋产量减少、死亡率增加等。目前，疫苗预防和采样检测是控制DTMUV感染的主要措施。
病毒E蛋白是病毒颗粒的主要表面膜蛋白，能够诱导宿主动物产生中和性抗体，是许多病毒的抗原表位。因此，利用E蛋白进行诊断和疫苗研制成为了一种重要的策略。因此，开展DTMUVE蛋白抗原表位的鉴定和建立相应的Epitope-ELISA方法，具有重要的理论和实践意义。
二、研究内容和方法
1.研究内容
（1）DTMUVE蛋白抗原表位的鉴定
（2）建立DTMUVE蛋白的Epitope-ELISA方法
2.研究方法
（1）利用免疫学技术鉴定DTMUVE蛋白的表位
（2）对表位进行序列分析、结构和功能预测
（3）合成抗原表位多肽，制备特异性单克隆抗体
（4）建立DTMUVE蛋白的Epitope-ELISA方法
三、研究计划进度安排
1.第一年
（1）进行DTMUVE蛋白表位的筛选和鉴定
（2）对表位进行序列分析和结构预测
（3）合成抗原表位多肽，制备特异性单克隆抗体
2.第二年
（1）建立DTMUVE蛋白的Epitope-ELISA方法
（2）对方法进行优化和验证
（3）应用建立的方法进行DTMUV感染检测
3.第三年
（1）对建立的方法进行进一步验证和比较
（2）分析方法的敏感性和特异性
（3）对方法进行优化并推广应用
四、预期的研究成果
1.筛选和鉴定DTMUVE蛋白的特异性表位
2.制备特异性单克隆抗体
3.建立基于Epitope-ELISA的DTMUV感染检测方法
4.分析方法的优缺点并进行推广应用
五、存在的问题和解决思路
1.问题
（1）DTMUVE蛋白表位的鉴定需要花费相应的时间和成本
（2）特异性单克隆抗体制备技术难度较大
（3）DTMUV感染检测方法需要优化和验证
2.解决思路
（1）采用多种免疫学技术结合进行表位鉴定，提高筛选效率
（2）加强人员培训，掌握单克隆抗体制备技术
（3）结合实验分析对方法进行优化和验证，提高方法的敏感性和特异性
六、研究意义
1.建立基于Epitope-ELISA的DTMUV感染检测方法，为DTMUV的早期诊断提供了一种快速、敏感和特异性高的检测手段。
2.研究成果有望为DTMUV的疫苗研制和治疗提供新思路和新方法。
3.本研究可以为禽流感等禽类疾病的防控提供新的思路和方法。
七、参考文献
1.Zhang,Q.,Chen,J.,&Liu,G.(2017).DuckTembusuvirus:anewlyemergingvirus.Microbialpathogenesis,107,113-122.
2.Li,Y.J.,Chen,X.P.,Lv,X.J.,Li,J.,Wei,W.H.,&Jin,M.J.(2017).DevelopmentofablockingELISAusingamonoclonalantibodyagainstDuckTembusuvirusEprotein.Journalofveterinarydiagnosticinvestigation,29(6),820-825.
3.Su,J.,Li,S.,Hu,X.,Yu,X.,Wang,Y.,Liu,P.,...&Qin,Z.(2019).MonoclonalantibodiesagainstDuckTembusuvirusEproteinprotectducksfromviralinfection.Appliedmicrobiologyandbiotechnology,103(4),1865-1874.
4.Wang,X.,Zhang,S.,Wu,Y.,Wen,Y.,&Huang,Y.(2020).DetectionofduckTembusuvirususingrecombinantvirus-likeparticlesandcolloidalgoldimmunoassay.Journalofvirologicalmethods,279,113838.
5.Zhang,Y.G.,Xue,X.H.,Chen,H.Y.,&Song,Q.Q.(2020).AreviewofDuckTembusuvirusresearch.AnimalHealthResearchReviews,21(2),167-179.