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偏头痛相关microRNA表达谱及靶向Il-1β的microRNA筛选研究的任务书
任务书
课题名称：偏头痛相关microRNA表达谱及靶向Il-1β的microRNA筛选研究
研究背景与意义：
偏头痛是一种常见的神经血管性头痛，其发病率较高。虽然该疾病的病因尚未明确，但炎症反应是其发病机制的关键环节之一。实验研究表明，炎症反应诱导细胞分泌促炎因子，如Il-1β、Il-6等，这些因子能够激活星形胶质细胞，释放导致疼痛的物质，如NO、PGE2等。而microRNA作为新兴的非编码RNA分子，可通过调控基因表达，影响细胞生长、分化、凋亡、炎症反应等生物学过程。因此，研究偏头痛相关microRNA的表达谱及其对炎症反应的调控，可以为偏头痛的治疗提供新思路和药物靶点。
研究内容：
1.建立偏头痛模型。利用化学诱导法或电刺激法建立实验动物的偏头痛模型。
2.筛选差异表达的microRNA。通过microarray、RT-qPCR等方法，筛选出偏头痛相关的miRNA，分析其表达谱的差异，并进行生物信息学分析。
3.筛选靶向Il-1β的microRNA。通过bioinformatics工具，筛选出可能靶向Il-1β的microRNA，并利用luciferasereporter实验及Westernblotting进行验证。
4.研究microRNA对炎症反应的调控作用。通过实验验证，探讨筛选出的microRNA对炎症反应的调控作用机制及其对偏头痛治疗的意义。
研究方法与技术：
1.实验动物的建立及处理方法。建立偏头痛模型的方法如上述，处理方法可采用静脉注射药物、下颌神经刺激等。
2.microRNA的提取及检测方法。常用的microRNA提取方法有TRIzol法、miRNeasyMiniKit等，检测方法有microarray、RT-qPCR等。
3.bioinformatics分析。包括miRNA预测靶基因、GO注释、KEGG通路分析等。
4.分子生物学实验技术。包括luciferasereporter实验、Westernblotting等。
研究预期成果：
1.筛选出偏头痛相关的差异表达microRNA，分析其表达谱及生物信息学特征。
2.筛选出靶向Il-1β的microRNA，并验证其作用。
3.探讨microRNA对偏头痛炎症反应的调控机制，为该疾病的治疗提供新思路和药物靶点。
经费预算：
本研究预计经费为30万元，主要用于实验动物、试剂、科研设备购置与维护、论文发表等。其中实验动物与试剂费用占比较大，预计分别为10万元和8万元，科研设备购置与论文发表经费分别为6万元和6万元。
时间安排：
本研究计划于2021年9月开始，历时两年。第一年主要进行实验动物的建立、差异表达microRNA的筛选及初步验证；第二年主要进行microRNA对Il-1β的筛选、炎症反应的调控机制探究及论文撰写。
参考文献：
1.EspositoE,etal.Non-codingRNA:newbiomarkersofmigraine.NeurolSci,2019,40(Suppl1):135-140.
2.ChenK,etal.MicroRNA-155-deficientbonemarrowpromotesfunctionalrecoveryofmicefollowingspinalcordinjury.IntJMolMed,2018,42(6):3263-3270.
3.TütüncüM,etal.Roleofproinflammatorycytokinesandneuro-immuneinteractionsinpathophysiologyofmigraine.MedSciMonit,2015,21:3395-3409.