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禽致病性大肠杆菌ptsI的调控作用研究的任务书
任务书
任务名称：禽致病性大肠杆菌ptsI的调控作用研究
任务背景：
禽致病性大肠杆菌（APEC）是一种常见的家禽疾病病原，能够引起禽类的多种感染症状，导致死亡和生产损失，对畜牧业经济造成较大的影响。APEC病原菌之所以能够在宿主中快速定植，就是因为它能够在不同环境中适应和生存，并抵御宿主的免疫反应。对APEC的代谢途径和调控机制的研究是了解APEC生物学特性的重要途径，有助于防治和控制APEC的疾病。
任务目的：
本任务旨在研究APEC中ptsI基因的调控作用，探索这些调节机制的作用，以便更好地了解APEC的代谢机制和适应性。
任务内容：
1.制备APECptsI突变株
通过构建和分离APEC中ptsI基因的突变株，研究其生物学特性，包括生长速度、能量代谢和受体亲和力等指标，分析ptsI基因参与的代谢途径。
2.研究ptsI基因的转录调控机制
使用RT-qPCR技术研究ptsI基因的转录水平，筛选可能参与ptsI基因转录的转录因子。在存在和缺乏同源转录因子下分别进行转录实验，以确定这些目标转录因子是否是ptsI基因的直接调控因子。
3.研究ptsI基因的蛋白质调控机制
通过蛋白质互作技术（例如酵母双杂交筛选和质谱分析等）鉴定可能与ptsI基因调控相关的交互蛋白。筛选参与ptsI基因调控的可能酶学活性，进一步确定这些蛋白的作用和鉴定其在代谢途径中的位置。
4.建立ptsI基因的调控模型
根据实验结果构建ptsI基因的调控模型，描绘与ptsI调控相关的分子信号交互网络，并分析这些调控过程的调节机制与APEC代谢环境的关系。
任务成果：
1.制备和研究APECptsI突变株；
2.研究ptsI基因的转录调控机制；
3.研究ptsI基因的蛋白质调控机制；
4.建立ptsI基因的调控模型。
任务要求：
1.本任务的研究对象为禽致病性大肠杆菌；
2.所有研究工作必须遵循生物安全法律法规和实验室安全规定；
3.所有实验工作的细节和结果必须记录在实验笔记中；
4.所有研究结果需进行统计学分析，并应进行合适的呈现；
5.将研究结果整理成综述或论文提交。
参考文献：
1.Bernet-Camard,M.F.,andJoffre,A.(1987)ExpressionoftheptsoperoninEscherichiacoliK12:evidencefortranslationalcontrol.Mol.Gen.Genet.208,175–183.
2.Alam,K.K.,Clark,B.L.,andHecht,G.B.(2015)EvolutionaryhistoryoftheOmpF/Tffamilyofpore-formingproteins.J.Mol.Biol.427,1495–1510.
3.Cheng,W.,Yin,K.,Lu,D.,Liang,B.,Chen,Q.,Tang,H.,andJin,S.(2017)IdentificationofanovelpointmutationintherpoSgeneinanEscherichiacoliO157:H7strainthatacceleratesCaco-2cellinvasion.Front.CellInfect.Microbiol.7,469.