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miRNA154在肺癌骨转移中调控破骨细胞分化的机制研究的开题报告
一、研究背景
肺癌是世界上死亡率最高的恶性肿瘤之一，其中肺癌的骨转移是导致患者死亡的主要原因之一。破骨细胞分化是肺癌骨转移的关键过程，研究破骨细胞分化调控的分子机制有助于探讨肺癌骨转移的病理生理机制和寻找相关靶向治疗方法。
miRNA154是miRNA家族中的一员，已有研究表明miRNA154在调节多种肿瘤的发生和发展中起到重要的作用。然而，在研究肺癌骨转移中miRNA154的作用方面仍不清楚。本研究旨在探究miRNA154在肺癌骨转移中对破骨细胞分化的调控机制以及其在肺癌骨转移病理生理过程中的作用。
二、研究内容
1.建立肺癌细胞株NCL-H460的骨转移模型。将NCL-H460细胞株接种于BALB/c小鼠的股骨，通过组织学和骨髓灌流法验证模型的成功性。
2.检测miRNA154在骨转移模型中的表达水平。将摘除的肺癌组织和不同时间点的骨转移组织进行RNA分离提取，运用定量PCR检测miRNA154的表达水平。
3.使用文库筛选、蛋白质组学分析等方法鉴定miRNA154在调节破骨细胞分化中的作用机制。
4.搭建miRNA154结构域的突变体表达系统，验证其结构与功能之间的关系。
5.通过免疫组织化学等方法探究miRNA154在肺癌骨转移组织中的分布规律和表达量，研究miRNA154在肺癌骨转移病理生理过程中的作用。
三、研究意义
本研究将为深入研究肺癌骨转移的发生和发展提供基础数据，寻找潜在的治疗靶点。同时，研究miRNA154在肺癌骨转移中的作用机制，对于深入探讨miRNA家族在肿瘤发生和发展中的作用有重要意义。
四、研究方法
1.BALB/c小鼠建立NCL-H460肺癌骨转移模型。
2.RNA分离提取，定量PCR检测miRNA154表达水平。
3.鉴定miRNA154在调节破骨细胞分化中的作用机制，包括文库筛选和蛋白质组学分析等。
4.搭建miRNA154结构域的突变体表达系统，验证其结构与功能之间的关系。
5.通过免疫组织化学等方法探究miRNA154在肺癌骨转移组织中的分布规律和表达量。
五、预期成果
1.建立NCL-H460肺癌骨转移模型。
2.检测miRNA154在骨转移过程中的表达水平。
3.研究miRNA154在调控破骨细胞分化中的作用机制。
4.验证miRNA154结构域的功能与结构之间关系。
5.揭示miRNA154在肺癌骨转移中的作用。
六、研究时间安排
1.第一年：建立NCL-H460肺癌骨转移模型，检测miRNA154在骨转移过程中的表达水平。
2.第二年：鉴定miRNA154在调节破骨细胞分化中的作用机制。
3.第三年：搭建miRNA154结构域的突变体表达系统，揭示miRNA154在肺癌骨转移中的作用。