微生物培养技术33326ppt课件.ppt

专题一微生物培养技术微生物菌落细菌菌落一、微生物的分离和纯培养（一）无菌技术2、消毒A、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min，日常生活常用
B、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min，适用于不耐高温的液体，如牛奶。
C、化学药剂消毒法:用酒精进行皮肤消毒;
氯气消毒水源
D、射线消毒法，如紫外线（1）定义：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。（2）灭菌的方法：C、湿热灭菌
方法：高压蒸汽灭菌P8
适用于培养基的灭菌1、培养基定义：（课本）固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等

半固体培养基可观察微生物的运动

液体培养基常用于发酵工业。固体培养基半固体培养基液体培养基选择培养基鉴别培养基称量：准确地称取各种成分。牛肉膏比较黏稠，
可以用玻棒挑取，放在称量纸上称量。牛
肉膏和蛋白胨都容易吸潮，称量时动作要
迅速，称后要及时盖上瓶盖。（2）.溶化：
①加水加热熔化牛肉膏
将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯加入少量的
水，加热。当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒
取出称量纸。
②加入蛋白胨和氯化钠，用玻棒搅拌，使其溶解；
③加入琼脂；
④用蒸馏水定容到100mL。
整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。搁置斜面------斜面培养基(P11)待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯附近倒平板。倒平板技术（三）接种技术斜面培养基上接种方法平板培养基上接种方法平板划线操作⑵平板划线要点2、稀释涂布平板法系列稀释操作70%的酒精1、微生物实验室培养的基本操作程序（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基（2)配制培养基：计算称量；熔化；
调PH；分装；
灭菌；倒平板
（3）接种：平板划线法；稀释涂布平板法。
（4）培养：倒置，37℃恒温箱，12和24h。
（5）纯化培养：倒置，37℃恒温箱，24h。
（6）菌种保藏：临时、长期保存法。菌种的保存二、测定微生物的数量（一）测定微生物数量的方法2、间接计数法：1、土壤取样、制备土壤悬液423、样品稀释在以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂，
指示剂变红，就可以准确的鉴定该种细菌能够分解尿素。当菌落数目稳定时，选取菌落数在30～300的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。菌落数的选择：
一般选择菌落数在30～300的平板上进行计数。
当只有一个稀释倍数的平均菌落数符合此范围时，则
以该平均菌落乘以稀释的倍数；
若有两个稀释倍的平均菌落数均在30～300之
间，则按两者菌落总数之比值来决定：若比值小于2
应采取两者的平均数，若大于2，则取其中较小的菌
落总数。
三、培养基对微生物的选择作用（一）、基础知识（二）、筛选常用的刚果红染色法有两种（1）土壤取样（2）选择培养（可省略）

（3）梯度稀释（4）涂布培养

（5）挑选产生透明圈的菌落

（6）微生物培养（纯培养）