高效液相色谱-检测器.ppt

高效液相色谱检测器是高效液相色谱仪的核心部件，他负责把从色谱柱分离出来的各组分快速、准确的检测出来，实现定性、定量分析。
紫外可见吸收检测器
(ultraviolet－visibledetector，UV)

紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的
检测器，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
属于选择性检测器。

1、特点：灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，波长可选，对流动相的流速和温度变化不敏感，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达10-9g/ml以下，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与多种检测器串联使用。工作原理与结构同一般分光光度计相似，也就是装有流通池的紫外可见分光光度计。2、结构与原理：紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽(190nm～800nm)。
它有两个流通池，一个参比池，一个测量池。光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，即无信号输出。当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，即有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。
可变波长紫外检测器紫外/可见光检测器的光路系统，由氘灯提供190nm～600nm宽带光谱，光线径直射到全息凹面光栅上，衍射的单色光射到半透射反光镜，被分成两束光线，一束经流通池后照射到测量光电池上，另一束经参比池照射到参比光电池上，光电池把光能量转换成微小电流信号，光栅由一台微机控制的步进电机精确地驱动以改变波长。如图所示：
3、局限：对紫外吸收差的化合物如不含不饱和键的烃类等灵敏度很低。
流动相的选择受到一定限制，紫外吸收大的溶剂不能做流动相。每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，流动相的截止波长不能大于紫外吸收检测器的工作波长。
光电二极管阵列检测器
(photodiodearraydetector，PDA)2、原理与结构：检测器的接收是由一组光电二极管（数量由35～1024个不等）接收，并转换为电信号。光电二极管的排列（数字分辨）和狭缝宽度（光学分析）决定了检测器的全波长分析能力。还能获得色谱分离组分的三维光谱色谱图。

.三维谱图3、局限：对紫外吸收差的化合物灵敏度很低。流动相的选择受到一定限制，紫外吸收大的溶剂不能做流动相。二极管阵列少的话波长分辨率和灵敏度较低，商品价格也较贵。
荧光检测器
(fluorescencedetector，FD)2、原理与结构：由光源发出的光，经激发光单色器后，得到所需波长的激发光。通过检测池的激发光部分被样品吸收，并使其被激发后发射出荧光。在经选择发射波长的单色器分光后，单一波长的发射光被送至光电检测器进行检测。由于吸光强度与激发光强度成正比，光源应具有高强度、连续、平滑、稳定的辐射输出功能。荧光检测器常见荧光检测器光路图3、局限：只能适合于能产生荧光的物质（或通过衍生化能产生荧光的物质）的检测。其线性范围不如紫外检测器宽。示差折光检测器
(differentialrefractiveIndexdetector，RID)2、原理与结构：此检测器是基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品的含量。光从一种介质进入另一种介质时，由于两种物质的折射率不同就会产生折射。只要样品组分与流动相的折光指数不同，就可被检测，二者相差愈大，灵敏度愈高，在一定浓度范围内检测器的输出与溶质浓度成正比。示差折光检测器原理图电化学检测器(electrochemicaldetector，ED)原理及结构：基于离子性物质的溶液具有导电性，利用离子在电场中迁移导电进行检测，其电导率与离子的性质和浓度相关。当向电导池的两个电极施加电压时，溶液中的阴离子向阳极移动，阳离子向阴极移动。在电解质溶液中的离子数目和离子的移动速率决定溶液的电阻大小，离子的迁移率或单位电场中离子的速率取决于离子的电荷及其大小、介质类型、溶液温度和离子浓度。离子的迁移速率取决于施加电压的大小。所施加的电压既可以是直流电压，也可以是正弦波或方波电压。当施加的有效电位确定后，即可测量出电路中的电流值，即能测出电导值。结构图局限：对流速、温度敏感、干扰比较多。特点：高灵敏度、高选择性、应用很广，检测具有氧化还原活性（能发生电极反应）的物质。适于与反相色谱匹配。原理：当被分离的电活性物质流经电极表面时，由于溶液与电极间有电势差，电活性物质就要得到或失去电子，被还原或氧化，因此，溶液和电极间发生电荷转移，形成电流，该电流符合法拉第定律，即电流大小与待测物浓度成正比。记录电流随时间的变化，得到电泳谱图。结构图局限：流动相必须含有电解质，且呈化学隋性。只能检测具