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CEA多表位基因克隆、表达及免疫原性研究的中期报告
CEA(CarcinoembryonicAntigen)是一种糖蛋白，早期被发现存在于人类的胎儿和胎盘细胞中，因此被称为“癌胚抗原”。随后的研究表明，CEA在人类癌症发展过程中也起到了重要作用。由于CEA对人类健康和疾病有着重要的意义，在此我们进行了CEA多表位基因的克隆、表达及免疫原性研究。
一、CEA多表位基因的克隆
我们从人类肠癌组织中分离出mRNA，采用反转录PCR技术将CEA多表位基因全长（约1.8kb）扩增，然后将其克隆到原核表达质粒pET28a(+)上。我们对所构建的质粒进行了限制性酶切和测序验证。结果表明我们成功构建了CEA多表位基因的克隆质粒，命名为pET28a-CEA。
二、CEA多表位基因的表达
为了表达pET28a-CEA蛋白，我们将其转化到大肠杆菌BL21（DE3）中。并在含有IPTG（异丙基thiogalactoside）的LB培养基中诱导表达，然后收集菌体进行蛋白质电泳和Westernblotting分析。结果显示，IPTG诱导下转化菌体中可以检测到表达的His6-CEA蛋白，分子量为约70kDa。我们还对表达出的His6-CEA蛋白进行了纯化和检测。
三、CEA多表位基因的免疫原性研究
我们通过Westernblotting和ELISA的方法验证了表达的His6-CEA蛋白具有较好的免疫原性。Westernblotting结果显示了His6-CEA蛋白可以与CEA特异性抗体相互作用。ELISA结果表明，His6-CEA蛋白能够诱导产生特异性的CEA抗体，且具有良好的特异性和灵敏度。
四、总结
在本研究中，我们成功克隆了CEA多表位基因，并表达了His6-CEA蛋白。通过Westernblotting和ELISA的方法验证了表达的His6-CEA蛋白具有较好的免疫原性，可以诱导产生特异性的CEA抗体。这项研究为CEA的免疫学研究奠定了基础，为后续的肿瘤免疫治疗提供了重要的资料。