LIGHT基因转染细胞株和单克隆抗体的研制及其对T细胞的共刺激效应的中期报告.docx

LIGHT基因转染细胞株和单克隆抗体的研制及其对T细胞的共刺激效应的中期报告
一、背景
T细胞激活是免疫学研究中的核心问题之一，而细胞表面受体的激活和信号传递是T细胞激活的关键步骤。Co-stimulatorysignaling是参与T细胞激活的一种经典信号途径。在这一途径中，B7等分子作为共刺激分子结合到T细胞表面的CD28分子上，可以为T细胞激活提供协同作用。而LIGHT是一种新的供体分子，能够与其对应的受体HVEM结合起来，作为共刺激分子发挥作用。因此，研究LIGHT信号途径拥有一定的理论和实践意义。
二、研究内容和方法
为了研究LIGHT信号途径对于T细胞的共刺激效应，我们使用了基因转染技术构建出了LIGHT转染的细胞株，并使用单克隆抗体研究了LIGHT信号途径的功能和机制。
1.构建LIGHT转染细胞株
我们选择的细胞系为HEK293T和Jurkat，其中HEK293T是一种常见的转染细胞系，Jurkat则是一种T细胞模型系统。我们使用了LentiCRISPRv2质粒控制Cas9，打靶基因sgRNA和表达LIGHTcDNA的质粒对HEK293T和Jurkat进行了基因编辑。同时，我们成功地筛选出了表达LIGHT的稳定单克隆细胞株。
2.研究LIGHT信号途径的功能和机制
我们使用了单克隆抗体研究了LIGHT与其对应的受体HVEM之间的相互作用，以及活化T细胞的能力。同时，我们使用流式细胞仪、ELISA和Westernblot等技术研究了LIGHT信号途径对于T细胞的共刺激效应产生可能的分子和机制。
三、预期成果
我们预计通过本次研究，能够深入认识LIGHT信号途径对于T细胞共刺激和免疫应答反应的影响，为未来的免疫疗法提供基础研究现实的参考依据。