ES细胞抽提物诱导体细胞体外重编程的研究的中期报告.docx

ES细胞抽提物诱导体细胞体外重编程的研究的中期报告
本研究旨在探讨ES细胞抽提物对体细胞进行体外重编程的作用。本报告为中期报告，着重介绍了实验设计及初步结果。
实验设计：
1.实验对象：本实验选取小鼠成体成纤维细胞（MFFs）作为研究对象。
2.ES细胞抽提物制备：采用相同品系的小鼠ES细胞培养，取细胞培养物，离心去除上清，得到ES细胞抽提物（ES-CM）。
3.体外重编程实验组：将MFFs接种于ES-CM中，培养7天后，添加一定浓度的细胞因子，继续培养14天，观察细胞形态、生长等变化；同时，设置对照组，不添加ES-CM和细胞因子。
4.分子生物学检测：采用qPCR、Westernblot等方法，检测实验组和对照组中的细胞因子、转录因子和表观遗传修饰因子（如DNA甲基化酶等）表达情况，以及诱导细胞是否表达干细胞标志物Oct4、Sox2、Nanog等。
初步结果：
1.观察到接种于ES-CM中的MFFs呈现出不同于对照组的细胞形态和生长特点，包括较小的细胞体积、更紧密的细胞排列等。
2.qPCR和Westernblot结果表明，在实验组中，诱导细胞的转录因子及表观遗传修饰因子的表达水平上调，而对照组中并未检测到这些变化。
3.实验组中出现大量表达干细胞标志物Oct4、Sox2、Nanog等的细胞，而对照组中未见这种现象。
综上，初步结果表明ES细胞抽提物对体细胞进行体外重编程具有潜在的作用，但还需进一步深入研究。下一步将对实验组中的诱导细胞进行纯化培养，验证其是否能够分化为不同细胞系。