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Wntβ-catenin信号在BCG诱导肺脏上皮细胞凋亡中的调控机制研究的任务书
任务书
项目名称：Wntβ-catenin信号在BCG诱导肺脏上皮细胞凋亡中的调控机制研究
项目编号：xxxxxxxx
项目负责人：xxx
一、项目背景
结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，全球范围内仍然是严重的公共卫生问题。尽管目前已有预防和治疗结核病的有效方法，但这种疾病仍然危害着全球的健康和经济发展。此外，结核分枝杆菌感染可能导致或加剧其他疾病的发生，甚至可能导致多器官功能衰竭。因此，从细胞和分子层面深入探究结核病致病机理及其调控机制，对于预防和治疗该疾病具有重要意义。
在多数宿主防御机制中，感染巨噬细胞和结核病杆菌的相互作用是一种至关重要的防御方式。白细胞和小分子物质，例如巨噬细胞活化和细胞因子的释放，是引起结核分枝杆菌感染的生物学反应。这种生物学反应可能导致肺部结构和功能的改变。为了研究这种情况下感染机制，我们关注于如何BCG（卡介杆菌）感染时导致肺部细胞凋亡的原因及其调控机制。
二、项目目的
该项目旨在探究BCG的特异性信号通路，特别是Wntβ-catenin信号通路，在肺部上皮细胞凋亡中的作用及其具体调控机制，以期发现结核病致病机理的详细信息，为疾病的预防和治疗提供新的理解和方法。
三、研究计划
本研究主要任务如下：
1.建立BCG感染肺上皮细胞的体外模型；
2.检测Wntβ-catenin信号通路在BCG诱导肺上皮细胞凋亡过程中的影响；
3.明确Wntβ-catenin信号通路的分子机制，在肺部上皮细胞凋亡中的作用及其调控机制。
本项目将从以下几个方面开展研究：
1.建立BCG感染肺上皮细胞的体外模型。
采用H1299和A549细胞系，通过m.o.i.在不同时间点和不同浓度下进行BCG感染。使用Westernblot、qPCR等方法检测感染效果。根据细胞凋亡的程度和比例确定最佳的BCG感染条件。
2.检测Wntβ-catenin信号通路在BCG诱导肺上皮细胞凋亡过程中的影响。
使用TOP/FOP-Flash基因报告系统检测Wntβ-catenin信号通路在H1299和A549细胞株中的激活水平。采用Westernblot、qPCR等方法检测Wntβ-catenin信号通路的关键蛋白β-catenin在不同的条件下的表达水平和磷酸化状态。确定信号通路的激活与肺上皮细胞凋亡之间的关系。
3.明确Wntβ-catenin信号通路的分子机制，在肺部上皮细胞凋亡中的作用及其调控机制。
通过RNA-Seq、ChIP-Seq、复原实验等方法从转录和表观遗传学角度分析Wntβ-catenin信号通路的作用机制，明确信号通路介导的凋亡过程所涉及的分子机制。特别是确定Wntβ-catenin信号通路在小鼠或人体样本中的激活和凋亡水平，从而更好地理解Wntβ-catenin信号通路与结核病致病机制之间的关系。
四、研究意义
该研究的结果将有助于深入理解结核病的致病机理和Wntβ-catenin信号通路的调控机制，为疾病的预防和治疗提供新的生物学基础。此外，该研究还将探索肺上皮细胞在感染过程中的免疫应答机制，为新型疫苗和免疫疗法的开发提供新的思路和方法。