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鸭疫里氏杆菌sprA基因缺失突变株的构建及其生物学特性研究的任务书 任务书 任务名称:鸭疫里氏杆菌sprA基因缺失突变株的构建及其生物学特性研究 任务背景: 鸭疫是一种高致病性的细菌性病害,由鸭疫里氏杆菌引起。鸭疫病毒广泛分布于全球范围,对家禽养殖业造成了重大威胁。传统的预防和控制手段包括疫苗和抗生素的使用,但存在严重的安全和环境问题。因此,利用基因工程技术构建抗原性缺失突变株是预防和控制鸭疫的有效手段之一。 任务目的: 本任务的目的是利用基因工程技术构建鸭疫里氏杆菌的sprA基因缺失突变株,并研究其生物学特性。该研究将为鸭疫的预防和控制提供理论依据和技术支持,同时也为缺失特定基因的细菌株的构建提供一种实现方法。 任务内容: 1.sprA基因缺失突变株的构建 利用PCR技术获取鸭疫里氏杆菌的sprA基因序列,并设计特异性引物;利用聚合酶链式反应技术构建突变型的DNA片段;将突变型DNA片段转化到鸭疫里氏杆菌中,并利用基因克隆技术筛选获得sprA基因缺失突变株。 2.生物学特性评价 使用不同的生物学实验手段,对构建的sprA基因缺失突变株进行生物学特性评价。如:细菌生长速率、生长曲线和生长条件的优化;对外源物质的感受性分析等。 3.抗原性评价 使用抗原性分析方法测试sprA基因缺失突变株的抗原性,比较其与野生型菌株在抗原性方面的差异,为下一步研究提供基础数据。 4.基因表达分析 对比sprA基因缺失突变株和野生型菌株的基因表达情况,利用转录组学分析等方法,确定sprA基因在细菌的生长和代谢中的作用。 5.结果分析与讨论 对实验结果进行统计学和生物信息学分析,并对实验结果进行讨论,对构建的鸭疫里氏杆菌sprA基因缺失突变株的生物学特性及应用前景进行分析和总结。 任务时间: 本任务的时间周期为12个月,按以下时间表进行: 第1个月:制定计划,文献调研,实验室准备; 第2-6个月:基因克隆,细菌菌种筛选,生物学特性评价实验; 第7-9个月:抗原性评价和基因表达分析; 第10个月:数据分析和讨论; 第11个月:结果撰写和论文初稿完成; 第12个月:论文修改和完成。 参考文献: 1.杜俊宁.鸭疫理氏杆菌sprA基因缺失突变株的构建及生物学特性分析[D].中国农业科学院,2018. 2.ZhangG,WenY,LuJ,etal.ProteomeanalysisofavirulentisolateofRiemerellaanatipestiferrevealsanovelphenotypeforpathogenadaptationandvirulence[J].Veterinarymicrobiology,2011,149(1-2):374-382. 3.NagarajaKV,ShivachandraSB.Riemerellaanatipestiferinfectioninducks:areview[J].Veterinaryresearchcommunications,2011,35(1):1-37.