人脐血来源内皮祖细胞的分离、培养及鉴定的中期报告.docx
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人脐血来源内皮祖细胞的分离、培养及鉴定的中期报告.docx
人脐血来源内皮祖细胞的分离、培养及鉴定的中期报告根据人脐血来源内皮祖细胞的分离、培养及鉴定的研究计划,在实验室内对脐血样本进行了一系列处理和操作,现进行中期报告。一、实验方法1.脐血样本采集:在产前咨询过程中已征得孕妇同意,采集脐带血样本,共计10份。2.密度梯度离心分离内皮祖细胞:采用Ficoll-Paque密度梯度离心法分离内皮祖细胞。分离后,对细胞进行计数并计算细胞存活率。3.内皮祖细胞对AdipoRed染料的沉着性鉴定:采用AdipoRed染料进行内皮祖细胞沉着性的观察与鉴定,根据不同染色程度判断
人脐静脉血管壁内皮祖细胞的鉴定的综述报告.docx
人脐静脉血管壁内皮祖细胞的鉴定的综述报告人脐静脉血管壁内皮祖细胞是一种极其重要的干细胞类型,可以分化成多种细胞类型,具有广泛的应用价值。因此,对其进行鉴定是非常必要的。1.分离方法人脐静脉血管壁内皮祖细胞的分离方法主要包括胶原酶消化法、粘附法、悬浮法等。其中,胶原酶消化法是最常用的方法。将人脐静脉血管壁切成小块后,加入胶原酶和消化酶混合液,消化后进行细胞培养,过滤筛选即可分离出内皮祖细胞。2.鉴定方法内皮祖细胞的鉴定主要包括表面标记、免疫细胞化学染色等。以下是常用的鉴定方法:(1)CD34阳性、CD45阴
人脐静脉内皮细胞体外分离培养及鉴定.docx
人脐静脉内皮细胞体外分离培养及鉴定【摘要】目的探讨人脐静脉内皮细胞的原代培养方法提高体外分离培养血管内皮细胞的成功率。建立血管内皮细胞培养模型为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法取2根脐带(至少20cm)冲净淤血采用加工穿刺针固定脐静脉灌注消化液一根用0.2%胶原酶Ⅱ另一根用0.1%胶原酶Ⅰ和0.25%胰酶等比混合消化液比较两种酶的消化效果。收集细胞并用含有10ng/mL的VEGF的培养基中培养观察细胞的生长及传代。并在倒置显微镜下观察细胞的形态学特点同时用免疫组织化
人脐静脉内皮细胞体外分离培养及鉴定.docx
人脐静脉内皮细胞体外分离培养及鉴定【摘要】目的探讨人脐静脉内皮细胞的原代培养方法提高体外分离培养血管内皮细胞的成功率。建立血管内皮细胞培养模型为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法取2根脐带(至少20cm)冲净淤血采用加工穿刺针固定脐静脉灌注消化液一根用0.2%胶原酶Ⅱ另一根用0.1%胶原酶Ⅰ和0.25%胰酶等比混合消化液比较两种酶的消化效果。收集细胞并用含有10ng/mL的VEGF的培养基中培养观察细胞的生长及传代。并在倒置显微镜下观察细胞的形态学特点同时用免疫组织化
人脐静脉内皮细胞分离培养的改进及其鉴定.docx
人脐静脉内皮细胞分离培养的改进及其鉴定【摘要】目的改进静脉内皮细胞原代培养的方法,提高体外培养血管内皮细胞的成功率。方法采用5号带柄一次性静脉输液针灌注消化液,分别用%、%胰蛋白酶和%胶原酶消化脐静脉内膜,比较三种酶液消化的结果,并在倒置相差显微镜下观察其形态特点,同时用免疫组织化学的方法对所得细胞进行鉴定。结果%、%胰蛋白酶和%胶原酶的最佳消化时间分别为15min,10min,12min。倒置相差显微镜下观察内皮细胞为单层生长,鹅卵石样镶嵌排列。免疫组织化学检测表明细胞内有Ⅷ因子相关抗原。结论胶原酶是分