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Periostin对胃癌侵袭转移的影响及其与上皮-间质转化关系的初步研究的开题报告
一、选题背景
胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其特有的恶性侵袭和转移能力令临床治疗面临较大的挑战。尽管在治疗手段不断更新，胃癌的治疗效果有所提升，但侵袭转移仍是引起胃癌患者死亡的主要原因。因此，探究胃癌侵袭转移的分子机制对于指导胃癌的治疗具有重要意义。
Periostin是一种新型的基质附着分子，具有调控过程的细胞膜、胞外基质附着的作用。Periostin除了在胚胎发育、生长、损伤修复等过程中发挥重要作用，其在维持肿瘤微环境的稳态中亦扮演极其重要的角色。近期的研究表明，Periostin在胃癌的发生、侵袭转移和预后中起到了重要的调控作用，但目前尚不清楚Periostin与上皮-间质转化（EMT）的关系。EMT是胃癌转移过程中重要的调控节点，其在调控肿瘤细胞的侵袭、转移中发挥重要作用，然而EMT的分子机制尚不完全清晰。
因此，本研究计划深入探究Periostin对于胃癌侵袭转移的影响及其与EMT的关系，进一步揭示胃癌转移的分子机制，为指导临床胃癌治疗提供参考。
二、研究目的
本研究旨在探究Periostin对胃癌侵袭转移的影响及其与EMT的关系，探究Periostin能否成为胃癌转移的潜在治疗靶点，为临床指导提供参考。
三、研究内容
1.实验方法
1.1胃癌细胞系的培养及扩增
选取高度转移性胃癌细胞株（如MGC-803、SGC-7901、BGC-823等），在高糖DMEM培养基中进行培养，并利用MTT法、克隆形成实验等方法检测细胞生长的速率。
1.2构建连接Periostin基因和启动子的表达载体
采用PCR技术将Periostin基因和启动子分别扩增，并经过酶切后连接到同一载体中，并验证其连接正确性。
1.3转染Periostin表达载体
通过转染Periostin表达载体，将Periostin基因导入胃癌细胞中，从而获得Periostin表达上调的胃癌细胞。
1.4Westernblotting法和Realtime-PCR的方法检测表达物
采用实时荧光定量PCR法和Westernblotting法检测胃癌细胞中Periostin基因和EMT相关蛋白的表达水平。
2.实验设计
2.1用MGC-803等胃癌细胞株为研究对象，建立Periostin表达上调细胞系。
2.2分析Periostin的表达水平与胃癌细胞的侵袭和转移能力的相关性，采用Transwell法等定量分析细胞的侵袭转移能力。
2.3在Periostin表达上调胃癌细胞中，采用Westernblotting法和Realtime-PCR检测EMT相关蛋白（如E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、Slug、Snail等）的表达水平。
2.4通过观察Periostin表达上调细胞系的形态学、胶原基质表达等方面，探究EMT调节机制在Periostin调控胃癌细胞转移侵袭过程中的作用。
四、研究意义
本研究将探究Periostin对胃癌侵袭转移的影响及其与EMT的关系，丰富胃癌转移治疗的分子机制，探索胃癌分子靶向治疗的潜在目标，有助于指导临床治疗胃癌，提高胃癌治疗效果，为我国胃癌治疗提供重要的基础研究数据支持。