鸡传染性法氏囊病病毒主要结构蛋白的克隆与表达的任务书.docx

鸡传染性法氏囊病病毒主要结构蛋白的克隆与表达的任务书
任务书
题目：鸡传染性法氏囊病病毒主要结构蛋白的克隆与表达
任务内容：
通过文献调研了解鸡传染性法氏囊病病毒的主要结构蛋白，并选择其中一个结构蛋白进行克隆和表达。
具体任务如下：
1.文献调研
首先需要通过文献调研了解鸡传染性法氏囊病病毒的基本信息、分类、病因、传播途径等；然后重点调研主要结构蛋白的结构、功能、表达及其应用领域等方面的信息。
2.克隆
在克隆前需要选择合适的载体和克隆位点。根据文献中提供的序列信息，设计引物并进行PCR扩增，将目标基因克隆入载体中。将正常重组的克隆通过测序进行验证。
3.表达
构建好克隆体后，可以进行转染，将克隆体带入到细胞内。选用适当的表达宿主和培养条件，促进重组蛋白的充分表达。然后对表达产品进行纯化和检测，包括SDS-PAGE、Westernblot等方法进行鉴定。
4.分析
分析表达蛋白的性质、稳定性、抗原性等，并根据其特性和应用需求进行选择。
任务目标：
完成本次任务后，能够掌握以下能力：
1.熟悉鸡传染性法氏囊病病毒的基本情况，了解主要结构蛋白的结构、功能等信息；
2.掌握PCR反应、克隆技术、转染技术、表达技术、蛋白纯化技术等相关技能；
3.熟悉蛋白检测方法和蛋白分析方法；
4.能够彻底理解和掌握本实验过程中的实验原理、实验操作和实验结果处理等方面的知识。
重点难点：
1.鸡传染性法氏囊病病毒研究的相关文献调研和主要结构蛋白的克隆筛选；
2.PCR扩增中重点选择引物和克服重复次数变异的问题；
3.蛋白表达过程中的宿主选择、转染技术、表达靶蛋白的优化等问题；
4.蛋白纯化过程中的保留活性和去除杂质；
5.蛋白纯化的鉴定方法和鉴定参数的判定。
参考文献：
1.DobosP.V.,etal.Biophysicalandbiochemicalcharacterizationoffiveanimalvirusfamilies[C].AdvancesinVirusResearch,1980:1-63.
2.LiC,etal.Detectionofinfectiousbursaldiseasevirus(IBDV)withmonoclonalantibodiestoVP2ofIBDV[J].Journalofveterinarydiagnosticinvestigation:officialpublicationoftheAmericanAssociationofVeterinaryLaboratoryDiagnosticians,Inc,1997,9(3):295-302.
3.AkisterK,etal.MultipleBritishandIrishanimalspeciesharboranidenticalnovelgammaherpesvirus[J].Journalofvirology,2013,87(2):10295-10315.
4.ZhouJJ,etal.HeterologousexpressionofarecombinanthepatitisEvirus-likeparticleofswine-origininPichiapastoris[J].Virologyjournal,2011,8(1):382.
预期结果：
完成本次任务后，可以得到克隆好的含重组质粒和表达蛋白等相关产物。同时，也会对主要结构蛋白在生物学研究、疫苗制备以及药物筛选等方面的应用有更全面和深入的认识和了解。