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瘦素和SIRT1对骨肉瘤细胞增殖、转移的影响及机制研究的开题报告
题目：瘦素和SIRT1对骨肉瘤细胞增殖、转移的影响及机制研究
一、研究背景
骨肉瘤是恶性肿瘤的一种，主要发生在儿童和青少年身上，其特点是恶性程度高、易转移、治疗难度大等，严重威胁患者的生命健康。当前，临床治疗骨肉瘤的手段仍较为有限，因此寻找新的治疗方法和药物具有重要意义。
瘦素是胰岛素样生长因子1（IGF1）家族中的一种蛋白质，与骨肉瘤的发生、发展密切相关。研究表明，瘦素受体（LEPR）被过度表达时，对骨肉瘤的增殖、转移有促进作用；而LEPR被拮抗时，则可抑制骨肉瘤的生长和转移。因此，瘦素-LEPR途径在骨肉瘤治疗中具有重要的生物学意义。
SIRT1是在各种肿瘤中通常表达较低的一种蛋白质，在肿瘤发生和发展过程中发挥了复杂的调控生物学活动。研究表明，SIRT1可以通过介导细胞凋亡、自噬、血管生成等信号途径来影响骨肉瘤的生长和转移。
二、研究目的
本研究目的为探究瘦素和SIRT1对骨肉瘤细胞增殖、转移的影响，以及两者在影响骨肉瘤细胞的机制。
三、研究内容和方法
1、瘦素和SIRT1调控骨肉瘤细胞增殖的实验
本实验采用MTT法检测瘦素或SIRT1通过不同的浓度及处理时间对MG-63细胞的生长活力的影响。其中，对照组为未处理的MG-63细胞，实验组为分别使用5、10、15、20μmol的瘦素或SIRT1对MG-63细胞进行处理12、24、48、72h。MTT法检测各组细胞的增殖情况。
2、瘦素和SIRT1对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的实验
本实验采用Transwell小室实验检测瘦素或SIRT1通过不同的浓度及处理时间对MG-63细胞迁移和侵袭能力的影响。其中MG-63细胞分别在1×10^5/ml的浓度下进行悬浮液细胞处理。对照组为未处理的MG-63细胞，实验组为分别使用5、10、15、20μmol的瘦素或SIRT1对MG-63细胞进行处理12、24、48、72h。Transwell小室描记各组细胞的迁移和侵袭情况。
3、瘦素、SIRT1在骨肉瘤细胞增殖和转移的相互作用
本实验采用Westernblot方法检测瘦素和SIRT1在骨肉瘤细胞增殖和转移的相互作用。其中，对照组为未处理的MG-63细胞，实验组为分别使用5、10、15、20μmol的瘦素或SIRT1对MG-63细胞进行处理，分别采集细胞组织，使用Westernblot方法检测瘦素和SIRT1的表达水平。
四、研究意义
1、为深入探究瘦素和SIRT1对骨肉瘤增殖、转移的作用提供新的研究资料；
2、为研究骨肉瘤的分子机制提供参考，为药物和治疗手段的研发提供新的思路和方向；
3、本研究结果具有重要的理论和实践价值，对临床骨肉瘤治疗具有积极的指导意义。
五、参考文献
1．WuY,GuC,HuangL,etal.LEPRhypomethylationissignificantlyassociatedwithgastriccancerinmales[J].Gene,2017,600:12-19.
2．ShinDH,LeeHJ,MinHY,etal.SIRT1/adenosinemonophosphateactivatedproteinkinaseαsignalingenhancesmacrophagepolarizationtoananti-inflammatoryphenotypeinrheumatoidarthritis[J].FrontInterImmun,2017,8:1135.
3．TabeY,YamamotoS,SaitohK,etal.BonemarrowadipocytesfacilitatefattyacidoxidationactivatingATM-AMPK-SIRT1signalinginacutemyeloidleukemiacells[J].Blood,2017,129(4):539-551.