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尿液化学检验 1.掌握:胆红素、尿胆原与尿胆素、HCG 2.熟悉:血红蛋白、肌红蛋白、本周蛋白 3.了解:亚硝酸盐、白细胞酯酶、维生素C一.胆红素、尿胆原与尿胆素胆红素是体内铁卟啉类化合物的主要分解代谢产物 是人体胆汁中的主要色素,呈橙黄色。 来源 衰老红细胞破坏、降解而来,占总量的80-85%; 无效造血所产生的胆红素,约15%; 含血红素蛋白,如肌红蛋白、过氧化物酶等的破坏分解。 正常人参考值 定量: 血浆胆红素3.4~17.1μmol/L 定性: 尿胆红素:阴性 尿胆原:阴性或是弱阳性 尿胆素:阴性 黄疸 尿胆红素(橙黄色) 尿胆原(无色) 尿胆素(黄色)尿液胆红素检验测定方法氧化法: 胆红素氧化可生成胆绿素,呈绿色 Smith碘环法:简单,灵敏度低 Harrison法:胆红素与氯化钡反应,形成钡盐沉淀吸附胆红素,滴加酸性FeCl3,胆红素氧化为胆绿素——灵敏度较高,操作复杂标本:新鲜、棕色容器避光保存(胆红素氧化) 检查中:规范操作,试剂量准确; 检查后:分析药物干扰;试带法结果可疑时,氧化法(harrison法)验证。参考值临床意义尿胆原及尿胆素检查检测方法注意问题尿胆素——湿化学Schleisinger法 在尿液之中加碘液,尿胆原氧化成尿胆素,再加饱和乙酸锌,尿胆素与锌离子作用,观察绿色荧光(尿胆素-锌复合物) 当UBG阴性时,可做尿胆素检查 检查UBG或尿胆素时,应去除尿胆红素,以免干扰参考值临床意义二.血红蛋白与肌红蛋白尿血红蛋白检查血红蛋白尿检测方法试带法: 简便、快速,筛检 不同的试带灵敏度不同 与游离Hb及RBC均反应;在高蛋白、高比重尿液中,红细胞不溶解 假阳率高:氧化剂污染、尿路感染等(细菌产生过氧化物酶) 假阴性:维C、甲醛、亚硝酸盐(还原性物质致反应延迟) 化学法: 操作简单,但试剂不稳定,特异性较低 假阳性(过氧化物酶等),假阴性(维C等) 免疫法:简便、特异、灵敏;可作为确证试验标本新鲜,容器清洁,试剂可靠(过氧化氢) 检测中:2种水平质控;操作规范 检测后:正确分析审核,用药或血尿、Mb尿尿Hb定性:阴性尿肌红蛋白检查血红蛋白与肌红蛋白【检测原理】【方法学评价】标本新鲜;碱性环境保存(4℃,7天) 检测中:防止局部浓度过高的硫酸铵,引起假阴性;调节pH值7.0~7.5 检测后:正确分析审核尿Mb定性:阴性三.亚硝酸盐、白细胞酯酶与维生素C【检测原理】 试带法(还原法): 尿NIT+对氨基苯磺胺 重氮盐+3-羟基-1,2,3,4-四羟并喹啉 红色偶氮化合物1.阳性检出率取决于: 尿路感染的病原微生物种类 体内适量硝酸盐的存在 尿液在膀胱内停留的时间(4h) 药物的影响 2.灵敏度0.3~0.6mg/L菌尿症常见微生物及致病率检测前:标本要求(晨尿,及时送检) 检测中:2种水平质控;试带纸; 检测后:综合分析NIT、试带法白细胞酯酶结果,必要时镜检。阴性(二)白细胞酯酶1.灵敏度:5~15/μl; 特异性较强:只对粒细胞反应,而与淋巴细胞和单核细胞不发生反应。 2.干扰因素:假阳性:分泌物、尿液中红色药物或食物 假阴性:维C、高比重尿、尿液白细胞少于10-25/μL,尿液偏酸等【质控】阴性(三)维生素C【方法学评价】【质控】【参考值】检测项目尿人绒毛膜促性腺激素检查examinationofhumanchorionicgonadotropin,HCG一.基本概念黄体生成素(LH) 促卵泡激素(FSH) 促甲状腺激素(TSH)根据这一特点制备了β-hCG单克隆抗体 将上述激素之间的交叉反应降低到最低值 提高了试验的特异性与敏感性检测方法免疫胶体金法免疫胶体金法操作阳性:试带上质控线和检测线均显紫红色; 阴性:仅质控线为紫红色; 无效:质控线和检测线均不显色(试带失效)1.标本新鲜晨尿离心取上清 2.蛋白尿、血尿、菌尿不易使用 3.阴阳性对照,做原浓度及2倍稀释浓度尿液检查四.临床意义诊断早期妊娠 肿瘤诊断及预后观察 诊断流产 协助诊断异位妊娠 其他受精卵6天左右滋养层细胞开始分泌hCG 8~10周达高峰 12周后逐渐下降 产后5~6天消失 在受精卵形成后5~7天金标法 孕妇尿检出又称“早早孕”试验 滋养层细胞肿瘤 (葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜癌) 治疗前,尿中hCG含量明显高于正常孕妇 治疗后,尿中hCG含量明显减少 完全流产成阴性 人工流产后hCG呈阳性,提示宫内尚有残存的胚胎组织异位妊娠60-80%HCG阳性,且浓度增高低于正常妊娠。 HCG阴性者不能排除异位妊娠 尿本周蛋白检查Bence-Jonesprotein,BJP一.概念二.检测原理、质控与临床意义(一)检测原理 过筛法 热沉淀-溶解法:凝溶蛋白特性 对甲苯磺酸法(TSA):特异沉淀小分子BJP 确证试验 免疫固定电泳:区带