中草药蒲黄和桃仁的纤溶酶分离与纯化的中期报告.docx

中草药蒲黄和桃仁的纤溶酶分离与纯化的中期报告
一、背景
纤溶酶是一种在血液中发挥重要作用的酶，能够促进纤维蛋白溶解，维持血管内的血液流动性，预防血栓形成和心血管疾病的发生。在中草药中，蒲黄和桃仁是两种常用的具有降血脂、抗血栓和抗炎等功能的药材，其中含有大量的纤溶酶。因此，了解蒲黄和桃仁中纤溶酶的分离和纯化方法，对深入研究其药理作用及开发有效的血液疾病治疗药物具有重要意义。
二、实验方法
1.提取物制备
将蒲黄和桃仁分别粉碎后，以10倍体积的蒸馏水浸泡6小时，然后过滤，用同等体积的醇沉淀，离心收集上层液体，干燥后得到提取物。
2.纤溶酶酶活测定
将提取物溶于0.01mol/L的PBS缓冲液中，并用比色法检测其酶活。具体方法为，将0.5mL的提取物加入含1mg/mL的人纤维蛋白溶解物的PBS缓冲液中，于37℃下反应30min后，加入0.5mL的10%三硝基苯酚溶液，混匀后2min后，加入0.5mL的2NNaOH溶液，并在540nm处读取吸光度。
3.离子交换层析
将提取物溶解于0.5mol/LNaCl的PBS缓冲液中，用DEAE-52离子交换层析柱层析，洗脱后的纤溶酶经酶活检测后红色溶液收集保存。
三、实验结果
1.提取物的制备
通过浸泡和醇沉法，获得了蒲黄和桃仁的提取物。其中，蒲黄提取物颜色呈黄色，桃仁提取物颜色呈浅棕色。
2.纤溶酶酶活测定
蒲黄和桃仁提取物均含有纤溶酶活性，其酶活测定吸光度值分别为0.468和0.564。
3.离子交换层析
待续。
四、结论
通过对蒲黄和桃仁提取物的纤溶酶活性测定，证实了两种药材中确实含有纤溶酶。离子交换层析的具体结果待实验完成后进行分析和总结。