HGF对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞ILK表达和FN分泌的影响的任务书.docx

HGF对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞ILK表达和FN分泌的影响的任务书
任务书
题目：HGF对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞ILK表达和FN分泌的影响
背景：
糖尿病是一种代谢性疾病，其最常见的并发症之一是糖尿病肾病。糖尿病肾病又分为多种类型，其中以系膜增生型肾小球硬化症最为常见。研究表明，高糖环境是导致系膜细胞增生和基质沉积的重要因素。
肾小球系膜细胞是肾小球结构的重要组成部分，该细胞可以分泌一系列基质蛋白，如纤维连接蛋白（FN）、胶原蛋白等。这些基质蛋白的分泌和积累是糖尿病肾病的重要病理基础。
HGF是一种重要的细胞因子，其能够通过活化ILK信号通路，调节肾小球系膜细胞的增殖和分化。一些研究表明，HGF通过调节系膜细胞的基质蛋白分泌来维持肾小球的功能。
因此，研究HGF在高糖环境下对系膜细胞ILK表达和FN分泌的调节机制，对于理解糖尿病肾病的病理过程具有重要的意义。
研究内容：
1.建立高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞培养模型。
2.研究HGF在高糖环境下对系膜细胞增殖的影响。
3.检测HGF对高糖环境下系膜细胞ILK基因和蛋白表达的调节作用。
4.研究HGF对高糖环境下系膜细胞FN分泌的影响。
5.分析HGF通过ILK信号通路调节系膜细胞FN分泌的机制。
方法：
1.取大鼠肾小球系膜细胞，按9：1的比例混合DMEM（高糖，30mM）和FBS（10%）制作培养基，培养细胞24h，待细胞贴附于培养皿底后，更换培养基为含不同浓度HGF的培养基进行处理。HGF的浓度为0、10、20、50、100ng/mL。
2.CCK-8法检测HGF对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响。
3.实时荧光定量PCR法检测HGF对系膜细胞ILK基因表达的影响。
4.Westernblot法检测HGF对系膜细胞ILK蛋白表达的影响。
5.ELISA法检测HGF对系膜细胞FN分泌的影响。
6.利用药物干预或基因敲除技术进一步研究HGF通过ILK信号通路调节系膜细胞FN分泌的机制。
计划时间：
第一周：收集相关文献，制定研究方案和实验设计。
第二周：细胞培养试验和处理，CCK-8法检测细胞增殖。
第三周：实时荧光定量PCR法检测ILK基因的表达和Westernblot检测ILK蛋白的表达。
第四周：ELISA法检测FN的分泌和对结果进行分析和统计。
第五周：根据实验结果进行讨论和整理，撰写实验报告。