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CMV2b蛋白与寄主互作研究中诱饵质粒的构建的中期报告 CMV2b蛋白是一种在植物体内发挥抗病毒作用的重要蛋白质。为了深入研究CMV2b蛋白与寄主互作的机制,本研究设计构建了适用于酵母双杂交实验的诱饵质粒pGBKT7-CMV2b。以下是该诱饵质粒构建的中期报告: 1.质粒构建:首先根据CMV2b蛋白的序列设计了一对引物,并通过PCR扩增得到CMV2b基因。然后将CMV2b基因与质粒pGBKT7进行酶切,并利用T4连接酶进行连接,得到目的诱饵质粒pGBKT7-CMV2b。 2.验证诱饵质粒:利用DNA序列分析验证了目的序列的正确性。通过酵母转化实验,验证了构建的诱饵质粒pGBKT7-CMV2b可以被酵母菌株Y2检测到,并且此时的酵母菌株Y2无异于对照组。 3.验证融合蛋白:将目的序列插入到pGBKT7质粒中,得到的融合蛋白可以特异性地结合到钓鱼诱饵,进一步验证了构建的诱饵质粒的可靠性。 通过以上实验的验证,说明我们所构建的CMV2b蛋白诱饵质粒pGBKT7-CMV2b是可靠的,可以为后期的CMV2b蛋白与寄主互作研究提供坚实的实验基础。