印楝素对黑腹果蝇细胞凋亡基因的调控作用的任务书.docx

印楝素对黑腹果蝇细胞凋亡基因的调控作用的任务书
任务背景：
印楝素是一种天然的生物碱化合物，在中药印楝中广泛存在。相信许多人都听说过印楝素有抗肿瘤的作用，但其具体的分子机制却鲜有人了解。最近的研究发现，印楝素可以通过调节细胞凋亡基因的表达来抑制肿瘤的生长。而黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）由于其短寿命、生殖率高、育种方便等特点，成为了生物学中非常重要的模式生物之一。
任务描述：
本次任务将以黑腹果蝇作为模式生物，探究印楝素对黑腹果蝇细胞凋亡基因的调控机制。具体任务如下：
1.收集印楝素在黑腹果蝇中调控细胞凋亡基因的文献资料。分析印楝素对哪些细胞凋亡基因起到了调控作用。
2.利用现有的黑腹果蝇基因编辑技术建立印楝素敏感的黑腹果蝇株系（建议选用p53或bax基因敲除的株系）。分析敏感株系的表型变化。
3.利用qPCR、Westernblot等实验手段，测定印楝素处理后黑腹果蝇株系中关键细胞凋亡基因的表达水平。
4.建立经典的TUNEL实验（终末脱氧核糖核酸末端标记）或ANNEXINV-FITC/PI双染实验，检测印楝素对黑腹果蝇细胞凋亡率的影响。
5.结合以上实验数据，分析印楝素对黑腹果蝇细胞凋亡机制的调控模式。
任务要求：
1.本次任务需要熟练掌握黑腹果蝇的养殖及分离、基因编辑技术、常规分子生物学实验技术等相关实验技能。
2.实验前请充分调研相关文献，建立实验设计方案，并详细记录实验过程和结果。
3.完成实验后需撰写实验报告，包括研究背景、实验设计、实验过程、实验结果及分析、结论和进一步展望等部分，并对实验中可能存在的误差和问题作出合理的解释和讨论。
4.请保证实验数据的准确性和真实性，不得捏造、篡改数据。
参考资料：
1.LiuCetal.(2014)ThemultifacetedregulationofnakedcuticlebyNMYCinDrosophila.Genetics.
2.YiJetal.(2014)Identificationofanovelgene,semba,thatregulatessomaticmuscledevelopmentandgrowthinDrosophilamelanogaster.DevDyn.
3.MackayTFetal.(2012)TheDrosophilamelanogasterGeneticReferencePanel.Nature.
4.ChenYetal.(2011)ADrosophilamodelofHPVE6-inducedmalignancyrevealsessentialrolesforMagiandtheinsulinreceptor.PLoSPathog.
5.LeeWJetal.(2007)Pumilio/fem-3mRNAbindingfactor(FBF)-bindingsitesinthe3'untranslatedregionofC.elegansheterochronicgenelin-14.RNA.