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NES1基因在胃癌中的表达及甲基化调控机制的研究的开题报告 一、选题背景和意义 胃癌是一种高发于亚洲地区的恶性肿瘤,尽管在诊疗技术和治疗手段方面有所提升,但其病情依然危及患者的生命健康。现有研究表明,胃癌的发生发展受到多种因素的影响,其中基因表达与DNA甲基化调控机制的异常与胃癌的关系备受关注。NES1基因是人体内一种新型的抑癌基因,其能够控制多种肿瘤细胞的增殖、凋亡以及癌细胞的侵袭能力,减缓肿瘤发展的进程。但是,目前关于NES1基因在胃癌中的表达及其甲基化调控机制的研究还不充分,因此有必要对其开展深入研究,为胃癌的防治提供新的思路和方法。 二、研究目的 本研究旨在探究NES1基因在胃癌中的表达及其甲基化调控机制,具体研究目的如下: 1.研究NES1基因在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况; 2.分析NES1基因在胃癌细胞株中的表达情况,探讨其与胃癌细胞的侵袭能力的关系; 3.研究NES1基因的启动子区域的甲基化状态及其对NES1基因的表达的调控作用; 4.探究DNA甲基转移酶在NES1基因甲基化过程中的作用以及对胃癌细胞的影响。 三、研究内容和方法 1.研究样本 本研究将采集20例胃癌患者组织及其旁边正常组织,同时选取人胃癌细胞株作为研究样本。 2.实验方法 (1)qPCR:采用qPCR技术检测NES1基因在不同样本中的表达情况,分析其在胃癌细胞中的表达与侵袭能力之间的关系。 (2)甲基化特异性PCR(MSP):设计甲基化和非甲基化特异性引物,检测NES1基因甲基化状态并探究其对NES1基因表达的影响。 (3)DNA甲基转移酶抑制剂处理:采用DNA甲基转移酶抑制剂处理胃癌细胞,检测NES1基因表达情况的变化及其对癌细胞侵袭能力的影响。 四、预期结果 本研究预计得到如下结果: 1.NES1基因在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况有所差异。 2.NES1基因在胃癌细胞株中表达下降与胃癌细胞的侵袭能力增强有相关性。 3.NES1基因的启动子区域存在甲基化修饰,并且甲基化较高与NES1基因表达较低有相关性。 4.DNA甲基转移酶抑制剂处理后,NES1基因表达增加,胃癌细胞的侵袭能力减弱。 五、研究意义和创新点 1.本研究将揭示NES1基因在胃癌中的表达和甲基化状态,为胃癌的防治提供重要的理论研究基础。 2.结合NES1基因对癌细胞增殖和侵袭的抑制作用,本研究的结果将提供开发新型的治疗胃癌的靶向药物的思路和方法。 3.通过研究NES1基因的甲基化调控机制,本研究将为深入探究DNA甲基化在胃癌发生发展中的作用提供新的思路和方法。 四、研究进度安排 1.月份:完成选题和开题报告 2.月份:完成研究方案设计和实验方法的优化 3.月份:完成样本采集和搜集所需实验材料 4.月份:完成qPCR技术和MSP技术的优化和建立 5.月份:完成实验数据的采集、整理和分析 6.月份:完成全面数据统计和分析,撰写论文,准备答辩材料 7.月份:完成毕业论文答辩 八、参考文献 [1]SunC.Y.,XuP.X.NE1andNES1/KLK10:uniqueproteinsorjustanotherkallikrein?CritRevOncolHematol,2010,73(1):68-83. [2]Chua,P.M.,Yan,M.,Yang,L.,etal.FrequentmethylationofSPINT2ingastriccanceranditsrelationshiptoclinicalfactors.Clinicalandtranslationaloncology,2014,16(3):266-273. [3]Tan,H.,Yan,F.,Wang,Q.,etal.HypermethylationofCPNE6ingastriccanceranditsrelationshipwithclinicopathologicalfeatures.Digestivediseasesandsciences,2012,57(5):1215-1221. [4]Smith,E.Y.,Jin,L.,Shenoy,A.K.,etal.TGFβreceptorIphosphorylationintherenaldistalconvolutedtubuleepitheliumregulatesbloodpressure.JournaloftheAmericanSocietyofNephrology,2013,24(6):966-973. [5]Xu,S.B.,Wang,Y.,Tai,Y.H.,etal.LossofAngiopoietin-like7diminishestheregenerativecapacityofrenaltubularepithelialcellsafterren