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己糖激酶-Ⅱ在结肠癌细胞增殖和化疗中的作用及调控机制的开题报告 一、研究背景和意义 结肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,在全球范围内都是重大的公共卫生问题。虽然目前已经有了多种治疗手段,包括手术、放疗、化疗和靶向治疗等,但仍然存在着治疗效果不理想、药物耐受性等问题。因此,有必要研究结肠癌发生和发展的分子机制,找到更有效的治疗方法。 己糖激酶-Ⅱ(hexokinase-2,HK2)是一个重要的糖酵解关键调节酶,在肿瘤细胞中被广泛表达并参与着多种生物过程,如细胞增殖、代谢等。许多研究表明,HK2在结肠癌的发生和发展中扮演着不可忽视的角色,对HK2的调控可能成为结肠癌治疗的一个新的策略。 因此,本研究拟探究己糖激酶-Ⅱ在结肠癌细胞增殖和化疗中的作用及调控机制,以期为结肠癌的治疗提供新的思路和方法。 二、研究问题和假设 问题:HK2在结肠癌细胞中的作用及调控机制是什么? 假设:HK2在结肠癌细胞中促进了细胞增殖,并参与着化疗的耐药性。其中,miR-143可能通过下调HK2表达来抑制结肠癌细胞的增殖和化疗耐药性。 三、研究内容和方法 研究内容: 1.检测HK2在结肠癌细胞中的表达情况,并探究其与细胞增殖和化疗耐药性的关系。 2.利用miR-143的表达载体和siRNA技术来调节HK2在结肠癌细胞中的表达,分析其对结肠癌细胞增殖和化疗敏感性的影响。 3.进一步研究HK2在结肠癌细胞中的分子机制,如研究HK2与p53、Bcl-2等关键分子之间的相互作用等。 研究方法: 1.细胞培养:使用结肠癌细胞株HCT-116和SW480,分别测定HK2的表达情况,并进行细胞增殖和化疗实验。 2.miRNA转染:利用miR-143表达载体和siRNA技术来调节HK2表达。 3.蛋白质表达:采用Westernblotting检测各蛋白在细胞中的表达情况。 4.细胞增殖和化疗实验:MTT实验和流式细胞术。 四、研究预期结果 1.证实HK2在结肠癌细胞中促进了细胞增殖,并参与着化疗的耐药性。 2.miR-143通过下调HK2表达来抑制结肠癌细胞的增殖和化疗耐药性。 3.揭示HK2与p53、Bcl-2等分子之间的相互作用关系,进一步探究HK2在结肠癌发生和发展中的分子机制。 五、研究意义和贡献 1.明确了HK2在结肠癌细胞中的作用及调控机制,为结肠癌的治疗提供新的策略和思路。 2.为研究细胞代谢和分子机制提供了新的思路和方法,有助于深化对细胞代谢的了解。 3.丰富了关于miRNA在结肠癌治疗中的应用场景,为肿瘤基因治疗提供新的思路和方法。 4.具有一定的理论和实践意义,有助于推动结肠癌治疗领域的研究和发展。