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第五章发酵过程控制10第一节、发酵过程的主要控制参数3.搅拌转速(r/min) 搅拌转速是指搅拌器在发酵过程中的转动速度,通常以每1min的转数来表示。 它的大小与氧在发酵液中的传递速率与发酵液的均匀性有关。 4.搅拌功率(kw) 指搅拌器搅拌时所消耗的功率,常指每1m3发酵液所消耗的功率(kw/m3)。 它的大小与氧容量传递系数有关。5.空气流量[V/(V·min),简称VVM] 每1min内每单性体积发酵液通入空气的体积,也是需氧发酵的控制参数。 与氧的传递和其他控制参数有关。一般控制在0.5~1.0V/(V·min)范围内。 6.粘度(Pa·s) 粘度大小可以作为细胞生长或细胞形态的一项标志,也能反映发酵罐中菌丝分裂过程的情况。 通常用表观粘度表示之:它的大小可改变氧传递的阻力。7.浊度(%) 浊度是能及时反映单细胞生长状况的参数,对某些产品的生产是极其重要的参数。一般采用分光光度计的波长420~660nm测量。浊度对氨基酸、核苷酸等产品的生产是极其重要的。 8.料液流量(L/min) 这是控制流体进料的参数。(二)化学参数2.基质浓度(g或mg%) 是指发酵液中糖、氮、磷等重要营养物质的浓度。 它们的变化对产生菌的生长和产物的合成有着重要的影响,也是提高代谢产物产量的重要控制手段。 在发酵过程中,必须定时测定糖(还原糖和总糖)、氮(氨基氮或氨氮)等基质的浓度。3.溶解氧浓度[10-6(ppm)或饱和度(%)] 溶解氧是需氧菌发酵的必备条件。 利用溶氧浓度的变化,可了解产生菌对氧利用的规律,反映发酵的异常情况,也可作为发醉中间控制的参数及设备供氧能力的指标。 溶氧浓度一般用绝对含量(10-6)来表示、有时也用在相同条件下,氧在培养液中饱和浓度表示。4.产物的浓度[μg(u)/ml] 这是发酵产物产量高低或合成代谢正常与否的重要参数,也是决定发酵周期长短的根据。 5.废气中的氧含量(%) 废气中的氧含量与产生菌的摄氧率和供氧系数有关。 从废气中的O2的含量可以算出产生菌的摄氧率和发酵罐的供氧能力。6.废气中的CO2浓度(%) 废气中的CO2就是产生菌呼吸放出的CO2。测定它可以算出产生菌的呼吸熵,从而了解产生菌的呼吸代谢规律。 7.氧化还原电位(mV) 也是影响微生物生长及其生化活性的因素之一。对微生物,培养基最适宜和所允许的最大电位值,应与微生物本身的种类和生理状态有关。 其他化学参数:DNA、RNA、生物合成的酶等。(三)生物参数2.菌体浓度 菌体浓度简称菌浓,是控制微生物发酵的重要参数之一。 大小和变化速度对菌体的生化反应都有影响 在生产上,常常根据菌体浓度来决定适合的补料量和供氧量,以保证生产达到顶期的水平。(发酵液的菌体量和单位时间的菌浓、溶氧浓度、糖浓度、氮浓度和产物浓度等的变化值) 计算 (菌体的比生长速率、氧比消耗速率、糖比消耗速率、氮比消耗速率和产物比生产速率) (控制产生菌的代谢、决定补料和供氧工艺条件) 研究发酵动力学由此可见,取得发酵过程中正确可靠的各种数据是研究动力学的前提。遗憾的是现有的能直接从发酵罐中测量的参数不多,还难于做到把许多有用的参数就地通过传感方式变成各种输出信号。 目前较常测定的参数有温度、罐压、空气流量、搅拌转速、pH、溶氧、效价、糖含量、前体(如苯乙酸)浓度、菌体浓度(干重、离心压缩细胞体积%)等。不常测定的参数有氧化还原电位、粘度、排气中的O2和CO2含量等。第二节、发酵过程控制(2)温度还能改变菌种代谢产物的合成方向,细胞生长和代谢产物积累的最适温度也往往是不同的。 例如,青霉素产生菌的生长最适温度为30度,而产生青霉素的最适温度为25度; 2.最适温度的选择如: 四环素生长阶段280C,合成期260C后期再升温; 黑曲霉生长370C,产糖化酶32~340C。 最适温度选择要根据菌种与发酵阶段做试验。 (2)根据培养条件选择(3)根据菌生长情况 生长快的菌种,维持在较高温度时间要短些;生长慢的菌种,维持较高温度时间可长些。培养条件适宜,如营养丰富,通气能满足,那么前期温度可髙些,以利于菌的生长。 总的来说,温度的选择根据菌种生长阶段及培养条件综合考虑。要通过反复实践来定出最适温度。3.发酵热的产生和控制 (1)生物热(Q生物):产生菌在生长繁殖过程中产生的热能。 生物热与发酵类型有关 微生物进行有氧呼吸产生的热比厌氧发酵产生的热多 一摩尔葡萄糖彻底氧化成CO2和水 好氧:产生287.2千焦耳热量, 183千焦耳转变为高能化合物 104.2千焦以热的形式释放 厌氧:产生22.6千焦耳热量, 9.6千焦耳转变为高能化合物 13千焦以热的形式释放 生物热的大小,还与菌种和培养基成分等不同而变化。(2)搅拌热(Q搅拌):搅拌器转动引起的液体之间和液体与设备之间