生物制品生物制品学习PPT教案.pptx

第三章灭活剂、保护剂、与免疫增强剂（一）灭活：杀死病原微生物，但不影响免疫原性；其次是破坏血清的补体，以免干扰血清学反应结果。
灭活剂：灭活微生物的化学试剂。
灭活方法：物理灭活：加热、超声波及射线灭活微生物，此方法免疫原性易破坏，现很少使用（血清56°C半小时灭活补体用此方法）。
化学灭活：用化学试剂将病原微生物杀死，此方法经常使用。二、常用的灭活剂种类和原理原理：甲醛的醛基起灭活作用，可使
蛋白质的氨基→羟甲基胺
羧基→亚甲基二醇单酯
羟基→羟甲基酚
巯基→硫代亚甲基二醇浓度：需氧菌甲醛浓度到0、1%--0、2%.
厌氧菌0、4%--0、8%.
病毒0、05%--0、4%.
原则是浓度低，时间短，温度低可以灭活细菌，尽量减少破坏抗原（通常加入量，以甲醛含量量计算，折合福尔马林浓度）。（二）烷化剂：将烷基引入，形成烷基取代物，使微生物变性死亡。
原理：主要破坏病毒的核酸，作用于A：G碱基，引起DNA单链断裂或双链铰连。
此类常用于病毒灭活，种类有AEI—N-乙酰乙烯亚胺，加入浓度到0、05%。
BEI—二乙烯亚胺，浓度0、02%；EEI—2—乙基乙烯亚胺，GDA—缩水甘油醛。
灭活后加硫代硫酸钠可终止灭活，防止抗原损失。
保存：AEI，0--4°C一年，--20°C二年；BEI0--4°C保存一个月。（三）苯酚（石碳酸）人类用的第一个消毒药，具有特殊气味的无色结晶，易潮解成水溶液，与光、氧后颜色变紫色。
原理：蛋白质变性以及抑制氧化脱氢酶，芽孢和病毒对它抵抗力强。
灭活浓度：抑菌作用是0、2—0、5%（血清防腐），杀菌是1%，杀葡萄球菌是3%。
消毒常用它的衍生物，来苏儿（甲酚皂）3—5%浓度，特殊气味，覆盖其他气味，也是医院常用的。（四）结晶紫（龙胆紫），也叫紫药水，碱性染料，也叫甲紫或甲基青莲，化学名，六甲基副玫瑰苯胺。
原理：碱性阳离子可结合细菌阴离子羧基；干扰细胞壁粘肽合成；常作用于革兰氏阳性菌。
生物制品的应用有猪瘟结晶紫疫苗，鸡白痢染色抗原。三、影响灭活作用的因素（四）温度：温度与灭活成正比，每升高10度，金属类杀菌作用增加2—5倍。但高温超过40°C，抗原也损失大。
（五）时间：灭活时间与温度和浓度成反比，即灭活杀菌长，温度旧低，浓度也低，就可以杀灭细菌。
（六）pH：碱性快，酸性慢，酸性环境对抗原保护好。
（七）有机物存在：环境的有机物减低灭活的效果，微生物也是有机物。
四、灭活疫苗时的注意事项思考题：
什么叫灭活和灭火剂？
灭活剂的种类有哪些？
影响灭活的因素是什么？
灭活的注意事项有哪些？第二节保护剂按化学性质分类：
复合物：脱脂牛奶，血清。
糖类：蔗糖、乳糖。
盐类：乳酸钙、谷氨酸钠。
醇类：甘油，山梨醇，甘露醇。
酸类：柠檬酸，氨基酸。
聚合物：葡聚糖，聚乙烯吡咯酮。一、冻干保护剂的组成和作用保护剂的作用：二、影响保护剂效果的因素三、常用的保护剂(一)不同微生物用不同保护剂
细菌疫苗：10%蔗糖；5%蔗糖脱脂牛奶；5%蔗糖、1、5%明胶；10-20%脱脂牛奶。
厌氧菌苗：0、1%谷氨酸钠、10%乳糖；10%脱脂牛奶；7、5%葡萄糖血清。
病毒疫苗：多用混合保护剂，如5%蔗糖脱脂牛奶。(三)保护剂的添加：一般是疫苗和保护剂1：1加入（5%蔗糖脱脂牛奶—新城疫疫苗），还有是按疫苗量加入保护剂到规定浓度（如5%蔗糖明胶保护剂，加疫苗是先配浓度高的40%的蔗糖、12%明胶，然后按疫苗7份，保护剂1份混合。）。
弱毒疫苗饮水：加0、2%奶粉，以中和水中的有害离子和毒性物质。思考题：
什么叫保护剂？组成和作用是什么？
影响保护剂效果的因素有哪些？
常用保护剂有哪些？第三节免疫佐剂（二）佐剂具备的条件
1、安全无毒副作用。
2、无致癌性。
3、纯度高，吸附力强，易吸收。
4、不含与动物交叉免疫的抗原物质。
5、不引起机体对自身超敏性。
6、耐储存，1年以上，不变质。佐剂的分类：
按物理性质：颗粒型佐剂，非颗粒佐剂。
按生物学性质：微生物和非微生物佐剂。
按存储时间：储存型和非存储型。（一）颗粒型佐剂—将抗原包括成颗粒状。
1、盐类佐剂—氢氧化铝胶，明矾，磷酸三钙等。
2、油类佐剂
A、弗氏佐剂：1935年，美籍匈牙利学者Freund发明，分弗氏不完全佐剂：矿物油75-85%+加羊毛脂（乳化剂）15—25%，充分乳化即成，简写FIA,Freundsincompleteadvuant；弗氏完全佐剂：是在FIA中加入死结核杆菌或卡介苗即成，缩写FCA.。（二）非颗粒佐剂
肽类佐剂：胞壁酰二肽（结核杆菌细胞壁），脂肽及免疫调节多肽。
表面活性剂：海藻糖合成的衍生物。
核酸类：合成核苷酸聚合体，次黄嘌呤衍生物，免疫刺激序列DNA。三、常规免疫佐剂1、氢氧化铝胶
合成方法：有三种，铝粉加烧碱；明矾加碳酸钠以及明矾加氨水等。
明